بررسي حساسيت رده‌هاي سلولي CEF ،BT ،MDBK و Vero در مقايسه با سلول RBK نسبت به تكثير ويروس پاراآنفلوانزا گاوي تيپ 3 (bPI3V)

Evaluation of MDBK, BT, CEF and Vero cell lines sensitivity for replication of bovine parainfluenza virus type 3 (bPI3V) in comparison with RBK cell line

يكي از متداول‌ترين عوامل ويروسي ايجادكننده كمپلكس بيماري تنفسي گاو، ويروس پاراآنفلوانزا گاوي تيپ3 است كه متعلق به جنس رسپيروويروس مي‌باشد. از آنجايي‌كه رشد و تكثير اين ويروس به منظور تشخيص، توليد واكسن و پروژه‌هاي تحقيقاتي دركشت‌هاي سلولي صورت مي‌گيرد، تعيين مناسب‌ترين سويه سلولي اهميت زيادي دارد. مطالعه حاضر به منظور تعيين حساسيت سلول‌هاي لاين Vero ،BT ،MDBK و همچنين سلول پرايمريCEF نسبت به تكثير bPI3V در مقايسه با رده سلولي RBK انجام شده است. بدين‌منظور ابتدا مناسب‌ترين ميزان MOI براي سويه مورد نظر تعيين، سپس ويروس bPI3 به هر رده سلولي با MOI معلوم و سه بار تكرار تلقيح گرديد. ميزان تكثير با تيتراژ مايع رويي بعد از حداكثر 90 درصد تخريب سلولي به روش كربر برآورد شد. تجزيه و تحليل داده‌ها با روش آزمون آماري t-test نمونه‌هاي مستقل و نيز در قالب طرح كاملاً تصادفي با روش LSDا (i(SAS9.4صورت گرفت. نتايج نشان داد كه تفاوت بين ميزان رشد ويروس بر روي سلول RBK با سلول‌هاي MDBK و BT به صورت دو به ‌دو معني‌دار نبوده، اما نتايج آزمايش در مورد سلول‌هاي Vero و CEF در مقايسه با سلول RBK به صورت مجزا با 99 درصد اطمينان، معني‌دار مي‌باشند. نتايج آزمون LSD حاكي از عدم وجود اختلاف معني‌دار بين سه سلول MDBK ،RBK و BT و همچنين بين سلول‌هاي Vero و CEF مي‌باشد، اما ميان سلول‌هاي MDBK ،RBK و BT با Vero و CEF با 99 درصد اطمينان، اختلاف معني‌داري وجود دارد. در مجموع با توجه به حساسيت بالاي سلول RBK نسبت به تكثير ويروس bPI3، همچنين كشت آسان‌تر و سريع‌تر اين سلول، استفاده از آن به عنوان سوبسترا براي bPI3V ارجحيت دارد.

Bovine parainfluenza virus type 3 (bPI3V), as one of the most common viral agents causing bovine respiratory disease complex, belongs to the genus Respirovirus. The aim of this study was to compare the sensitivity of RBK, MDBK, BT, Vero cell lines and CEF primary cell for proliferation of bPI3V. For this purpose, first the best MOI for the selected bPI3V strain was determined on RBK cell line, and then used for sensitivity assay of each above cell lines. Tests repeated three times in the same condition and data were analyzed with independent samples t-test also as a completely randomized design with LSD method (SAS 9.4). According to the results of the t-test, there is no significant difference between the growth of the bPI3V on the RBK with MDBK and BT cell lines, whereas the RBK cell line showed a statistically significant difference with respect to Vero and CEF cell lines separately (P-value 0.01). No significant differences were seen between the RBK, MDBK, and BT cell lines as well as between Vero and CEF cells based on LSD test results, but RBK, MDBK and BT in comparison with Vero and CEF are significantly different with 99% confidence. It can be concluded that the RBK cell line, due to its higher sensitivity to bPI3V, as well as easier and faster cell culturing, is the superior to the other cell lines in this study.