بررسي ژنوتيپ هاي ژيارديا دئودناليس در بيماران بدون علامت با استفاده از ژن بتاژياردين

Genotyping of Giardia Duodenalis by β-giardin Gene in Asymptomatic Patients

سابقه و هدف: ژيارديازيس يك بيماري كلينيكي خود محدود شونده را ايجاد مي كند كه علائم مشخصه آن اسهال، كرامپ هاي شكمي، نفخ، كاهش وزن و سوء جذب مواد مي باشد. مواردي از ژيارديازيس بدون علائم باليني در كشورهاي در حال توسعه گزارش شده است كه برخي از ژنوتيپ ها در ايجاد آن دخيل هستند. هدف از اين مطالعه بررسي ژنوتيپ تك ياخته ژيارديا در بيماران فاقد علامت مبتلا به ژيارديازيس مي باشد. مواد و روش ها: تعداد 320 نمونه مدفوع از مراجعه كنندگان به مراكز بهداشتي شهرستان بهارستان (استان تهران) جمع آوري و با روش ميكروسكوپي از نظر كيست ژيارديا مورد بررسي قرار گرفت. نمونه هاي مثبت در دي كرومات پتاسيم 2.5 درصد در يخچال نگهداري و با استفاده از روشCTAB تخليصDNA انجام گرفت. تعيين ژنوتيپ انگل هاي ژيارديا به روش PCR–RFLP بر روي ژن بتاژياردين انجام گرفت. يافته ها: از 320 نمونه مورد بررسي، 25 نمونه از لحاظ كيست ژيارديا مثبت بود (7.8 درصد). كليه بيماران مبتلا به ژيارديازيس فاقد علامت بوده و ظاهر و رنگ نمونه ها نيز داراي قوام و قهوه اي بود. 4 نمونه مربوط به زنان (16 درصد) و 21 نمونه مربوط به آقايان (84 درصد) بود. پس از تكثير بخشي از ژن بتا ژياردين و هضم با آنزيم HaeIII، به ترتيب 16 نمونه (64 درصد) مربوط به مجموعهA و 9 نمونه (36 درصد) مربوط به مجموعهB شناسايي شد. پس از تعيين توالي مشخص شد كه ژنوتيپ هاي AII،BIII و BIV در شهرستان بهارستان شايع مي باشند. استنتاج: شايع ترين ژنوتيپ آلوده كننده ژيارديا دئودناليس در افراد فاقد علامت شهرستان بهارستان، مجموعه A مي باشد. با توجه به شناسايي ژنوتيپ هاي AII،BIII و BIV در اين منطقه احتمال وجود چرخه هاي انتقال آنتروپونوتيك و آنتروپوزئونوتيك وجود دارد.

Background and purpose: Giardiasis is a major diarrheal disease and the major symptoms include diarrhea, bloating, abdominal cramps, weight loss, and abdominal pain. In developing countries, some patients can carry giardia parasites without experiencing any symptoms and some genotypes are believed to be responsible for that. The aim of this study was the genotyping of giardia duodenalis in asymptomatic patients. Materials and methods: A total of 320 stool samples was collected from people attending Baharestan health centers in Tehran, Iran and investigated for giardia cyst by microscopic method. Positive samples were stored in Potassium dichromate 2.5% and 4ºC. DNA extraction was performed using CTAB method and genotyping was carried out by PCR-RFLP on β-giardin gene. Results: Among the samples, 25 were positive (7.8%). All patients suffering from giardiasis were asymptomatic and the appearance and color of samples were normal and brown, respectively. Four samples were found in women (16%) and 21 in men (84%). The results of RFLP on these samples revealed that 16 samples (64%) had infections with assemblage A and 9 samples (36%) were assemblage B. The phylogenetic tree revealed sub-assemblage AII, BIII, and BIV to be present in Baharestan. Conclusion: The most common genotype of Giardia duodenalis is assemblage A in asymptomatic people in Baharestan, Iran. Identification of AII, BIII, and BIV genotypes in this area indicates the possibility of anthroponotic and anthropozoonotic transmission cycles.