جداسازي باكتريوفاژ لايتيك مؤثر بر سويه هاي بيماريزاي اشريشيا كلي جداشده از عفونت زخم بيماران ديابتي

Isolation of lytic phages against pathogenic E.coli isolated from diabtic ulcers

زمينه و اهداف: در اين مطالعه باكتريوفاژ ليتيك موثر بر اشريشيا كلي مقاوم به درمان جداشده از نمونه زخم بيماران مبتلابه ديابت نوع دو جداسازي گرديد. مواد و روش كار: دو نمونه مختلف از زخم بيماران بستري در بيمارستان رازي رشت گرفته شد و سويه هاي اشريشيا كلي جداسازي شده با روش هاي استاندارد شناسايي شدند. نمونه برداري از فاضلاب همان بيمارستان براي جداسازي فاژ ليتيك انجام شد. از روش آگار دولايه براي جداسازي و مشاهده پلاك استفاده گرديد. براي تعيين واكنش كراسينگ فاژ روي سويه هاي باكتري جداسازي شده و 5 سويه استاندارد اشريشيا كلي انجام گرديد. در نهايت براي تاييد و بررسي مرفولوژيكي از ميكروسكوپ الكتروني گذاره استفاده شد. مورفوتيپ و خانواده فاژ جداشده بر اساس طبقه بندي Bradley و نسخه نهايي گزارش International Committee on Taxonomy of Viruses (ICTV)، به ترتيب مشخص گرديد. يافته ها: نتايج نشان داد كه باكتري هاي جداشده مقاومت بالايي در برابر آنتي بيوتيك هاي استفاده شده دارند. بر مبناي خصوصيت مورفولوژيك، ويروس جداشده متعلق به خانواده siphoviridae بود. بر مبناي طبقه بندي Bradley فاژ جداشده برعليه سويه هاي اشريشيا كلي متعلق به مورفوتايپ B1 بود. نتيجه گيري: فاژ جداشده در اين مطالعه مي تواند به طور موثر سويه هاي اشريشيا كلي بيماري زا جداشده از زخم بيماران ديابتي را ليز كنند. درنتيجه شايد بتوان به عنوان يك عامل درماني موثر در برابر عفونت هاي مقاوم به درمان مربوط به اين باكتري در داخل بدن در مطالعات آينده استفاده شود.

Background and Aim: In the present study, we have tried to isolate an effective lytic bacteriophages on drug-resistant Escherichia coli isolated from diabetic ulcer wounds. Materials and Methods: Two E.coli strains were isolated by using standard methods from patients in Razi Hospital of Rasht. Waste water of the same hospital was used as a source for isolation of lytic bacteriophages. Agar layer method was used to isolate and plaque finding. Determination of host range of isolated phages was performed using five standard reference collection of E. coli. Finally, Transmission electron microscopy was used for morphological analysis of the isolated bacteriophages. Morphotype and family of isolated phages were determined based on Bradley recommendation and final version of International Committee on Taxonomy of Viruses (ICTV) report, respectively. Results: The results showed that the isolated bacteria were highly resistant to the antibiotics tested. Based on morphological characteristics, the separated virus belongs to siphoviridae family. Based on Bradley classification, isolated phage against strains of E.coli belongs to the morphotype B1. Conclusions: The isolated bacteriophage from waste water efficiently lysed the multiresistant strains of E. coli. Therefore, bacteriophages could potentially be used as an alternative for antibiotics for treating infections by multiresistant E. coli.