شناسايي ژن aflR در قارچ آسپرژيلوس مولد افلاتوكسين جداشده از مغز پسته در منطقه سيرجان با استفاده از روش PCR در سال 1395

Identification of aflR Gene in Aflatoxigenic Aspergillus Isolated from Pistachio Kernel of Sirjan Region Using Molecular Method

زمينه و هدف: افلاتوكسين ها گروه بزرگي از مايكوتوكسين ها و متابوليت هاي ثانويه از گونه هاي قارچ آسپرژيلوس هستند. aflR گروهي از ژن هاي مداخله كننده در نسخه برداري و توليد آفلاتوكسين در قارچ هاي آسپرژيلوس هستند. در اين مطالعه هويت مولكولي قارچ آسپرژيلوس مولد سم افلاتوكسين در پسته هاي تازه شهرستان سيرجان بررسي شد. مواد و روش كار: تعداد 100 نمونه پسته آلوده به قارچ از انبارهاي پسته در شهرستان سيرجان به روش هدفمند اخذ شد. نمونه ها به محيط كشت سابورو دكستروز براث منتقل شدند. كنترل مثبت استفاده شده در اين پژوهش، سويه قارچ آسپرژيلوس مولد سم افلاتوكسين و كنترل منفي سوش قارچي غير آسپرژيلوس و آسپرژيلوس هاي غير آفلاتوكسيك بودند. استخراج DNA با استفاده از كيت و از PCR براي شناسايي ژن aflR در نمونه هاي آلوده به قارچ انبارهاي پسته استفاده شد. يافته ها: از بين 100 نمونه مغز پسته تازه كه به صورت هدفمند انتخاب شده بودند، 10 نمونه مورد سالم 64 نمونه آلوده به قارچ هاي آسپرژيلوس، 18 نمونه آلوده به قارچ پنيسليوم، 1 مورد موكور، 5 نمونه ساپروفيت و 2 مورد آلودگي قارچي ناشناخته گزارش شد. از بين آسپرژيلوس ها فقط در 7 مورد ژن تنظيمي مولد افلاتوكسين حضور داشت. نتيجه گيري: در بسياري از كشورها آلودگي پسته به آفلاتوكسين به مقادير مختلف وجود دارد، كه مي تواند تهديد كننده ي سلامت جامعه باشد. بهترين اقدام براي جلوگيري از پيامدها و كاهش آفلاتوكسين در پسته، نظارت و كنترل بر توليد، نگهداري و توزيع آن ها و تشخيص آلودگي توسط تكنيك هاي دقيق مولكولي است. هم چنين ايجاد شرايط ايده آل براي به حداقل رساندن آلودگي امري لازم براي سلامت مصرف كنندگان است.

Background and Aims: Aflatoxins are a large group of mycotoxins and secondary metabolites of Aspergillus fungal species. aflR The interfering genes group in the transcription and production of aflatoxin plays an important role in Aspergillus fungi. In this study, the molecular identity of aflatoxigenic Aspergillus spp. in fresh pistachios in Sirjan city was investigated. Materials and Methods: In This study 100 samples of fungal infected pistachio were purposefully collected from pistachio warehouses in Sirjan city. Samples were transferred to the sabouraud dextrose broth medium. The positive control used in this study were generator genes of aflatoxin in Aspergillus strains and negative control were non Aspergillus fungal strains and non aflatoxic Aspergillus. DNA extraction were performed by kit and PCR method was used for identification of AflR gene in samples of fungal infected pistachio warehouses for confirmation of the presence of the generator genes of aflatoxin. Results: Molecular results showed that among 100 samples of fresh pistachio nuts that were purposefully selected, there were 10 healthy samples, and in 64 Aspergillus fungi ones, 18 samples contained pencillium, 1 sample mucor, 5 sample Saprophytic and 2 samples contained unknown fungal infection. Among Aspergillus, only in 7 cases were regulatory gene of aflatoxin. Conclusions: By studying this subject, factors affecting on ways to reduce aflatoxin can be found. Since most countries are sensitive on the issue of aflatoxin in terms of health, this research can play an important role in the ways of increasing exports to countries.