بررسي اثر اسيدهيوميك بر ميزان رشد و تغييرات راديكال هاي فعال اكسيژن (ROS) در جلبك كلرلا ولگاريس (Chlorella vulgaris)

Investigation the Effects of Humic Acid on Growth Rate and Active Oxygen Radicals (ROS) Production in Chlorella Vulgaris Algae

زمينه و هدف: در سال ‫هاي اخير حضور مواد آلي طبيعي كه بعنوان عمده ترين آلاينده ‫هاي آب ‫هاي سطحي تامين كننده آب شرب محسوب مي ‫شوند، بطور فزاينده اي در حال افزايش مي ‫باشد. در نتيجه نياز ضروري جهت ارزيابي اثرات بيولوژيكي اين تركيبات روز بروز افزايش مي ‫يابد. از طرفي جلبك ‫ها با چرخه رشد كوتاه، قابليت كشت جداگانه و حساسيت بالا نسبت به سموم، از مهمترين گونه ‫ها در ارزيابي اثرات بيولوژيك سموم در محيط زيست مي ‫باشند. هدف از اين مطالعه، بررسي تاثيرات اسيد هيوميك در غلظت ‫هاي مختلف (mg/l 32-4) بر رشد و تغييرات راديكال‫ هاي فعال اكسيژن در جلبك كلرلا مي‫ باشد. روش كار: سلول‫ هاي جلبكي گونه كلرلا با تراكم نسبي 105×1 سلول در هر ميلي ليتر و غلظت‫ هاي مختلف اسيدهيوميك به محيط كشت اضافه گرديد. تعداد جلبك‫ ها بصورت روزانه شمارش و ميزان گونه‫ هاي اكسيژن فعال درون سلولي، توسط آزمون فلوريمتريك بررسي شد. يافته ها: اسيد هيوميك در غلظت هاي كم (4mg/l) در مدت 48 ساعت سبب افزايش معني ‫دار رشد جلبك ‫ها گرديد (0/05>p)، اما غلظت‫هاي بالاتر (8 ≤ mg/l) و بعد از مدت 72 ساعت، اثر سمي بر روي جلبك نشان داد. همچنين در حضور اسيدهيوميك، مقدار ROS درون سلولي نسبت به گروه كنترل بطور معني ‫داري افزايش يافت (0/05>p). نتيجه گيري: بنظر مي‫ رسد اسيدهيوميك اثر استرس اكسيداتيو بر روي جلبك كلرلا داشته و اثرات آن بصورت كاهش درصد رشد نسبي و ضريب ثابت رشد جلبك‫ ها و افزايش توليد ROS درون سلولي جلبك قابل مشاهده است

Background & objectives: Natural organic matter, which is considered the main pollutant of drinking water, is recently increasing. Therefore, assessing the biological effects of these compounds is very important. Algae with a short growth cycle, separate cultivation and high sensitivity to pesticides are among the most important species in assessing the biological effects of pesticides in the environment. The aim of this study was to determine the effects of different concentration of humic acid (4-132 mg/L) on the cell growth rate and Reactive Oxygen Species (ROS) production in Chlorella Vulgaris. Methods: Algae cells of chlorella species were added to the culture medium with relative density of 1×105 cells/ml and different concentrations of humic acid. The number of algae was counted daily and the amount of intracellular active oxygen species was assessed by fluorometric test. Results: Humic acid at low concentrations (4 mg/l) causes a significant increase in algae growth in 48 hours (p<0.05), but higher concentrations (8 ≤ mg/l) and duration time (≥72h), show a toxic effect on algae. However, higher concentrations (≥8 mg/l) and duration time (≥72h) showed toxicity effect on alge. In addition, in the presence of humic acid, the intracellular ROS level significantly increased compared to the control group (p<0.05). Conclusion: Oxidative stress seems to have oxidative stress effects on chlorella algae. These effects are decreasing the relative growth rate and the constant growth rate of algae and increasing intracellular ROS formation.