تعيين ناقلين هموفيلي A در خراسان جنوبي با استفاده از سه ماركر پلي مورفيسمBclI، HindIII وAlwNI

Carrier detection of hemophilia A in southern Khorasan using the 3 polymorphic sites of BclI, HindIII, and AlwNI

سابقه و هدف هموفيلـي A شايع‌تريـن اختـلال انعقادي وابسته به X است. ميزان شيوع اين بيماري در جوامع مختلف حدود 1 تا 2 در هر 10000 نوزاد پسر مي‌باشد. شيوع اين بيماري در خراسان جنوبي بسيار بالاست كه علت آن را شايد بتوان ايزوله بودن جمعيت آن و وجود ازدواج‌هاي فاميلي بسيار زياد در اين منطقه دانست. اين مطالعه جهت تعيين ناقلين هموفيلي A در دو روستاي كوشكك و توتكري و راه‌اندازي روش تشخيص پيش از تولد اين بيماري انجام گرفت. مواد وروش‌ها مطالعه انجام شده از نوع توصيفي بود. در اين تحقيق از 51 نفر(9 خانواده) شامل 34 بيمار هموفيل و خويشاوندان نزديك آن‌ها در دو روستاي بيرجند واقع در خراسان جنوبي نمونه‌گيري به عمل آمد و DNA آنان از خون محيطي استخراج گرديد. سه ماركر پلي‌مورفيسم داخل ژني در ژن فاكتور (VIII ( HindIII ، BclI و AlwNI براي تعيين ناقلين مورد استفاده قرار گرفت. يافته‌ها از بين 9 خانواده داراي فرزند مبتلا از 7 مادر خون‌گيري به عمل آمد. پس از استخراج DNA ، آزمايش‌هاي PCR-RFLP براي آنان انجام گرفت. بررسي‌هاي انجام شده نشان داد كه 3 مادر از نظر HindIII ، 2 نفر از نظر BclI و يك نفر از نظر AlwNI هتروزيگوت هستند و امكان رديابي آلل معيوب در اين خانواده‌ها وجود دارد. AlwNI فقط در يكي از 7 مادر مورد مطالعه آگاهي دهنده بود كه بر اساس شجره‌نامه، اين خانم از اهالي آن روستا نبوده و هيچ نسبتي با ديگر ساكنين روستا نداشت. در نهايت 4 خواهر ناقل در خانواده‌هاي داراي پسر مبتلا شناسايي شد و مي‌توان از نتايج به دست آمده جهت تشخيص پيش از تولد ناقلان شناسايي شده استفاده كرد. نتيجه گيري ماركرهاي پلي‌مورفيسم HindIII و BclI مي‌توانند ماركرهاي مناسبي براي تشخيص پيش از تولد هموفيلي در اين دو روستا باشند.

Background and Objectives Hemophilia A is the most common X-linked blood coagulation disorder. The prevalence rate of this disease in various communities is about 1-2/10000 males. The prevalence of hemophilia A is very high in southern Khorasan population, perhaps due to their isolation and high rate of consanguinity. The aim of this research was to detect hemophilia A carriers in two villages of southern Khorasan and set a prenatal diagnosis program for these families. Materials and Methods Blood samples of 34 patients with hemophilia A out of 51 family members (9 families) from two villages were collected. We were also able to collect samples from 7 mothers out of 9 families. Intragenic polymorphic sites in factor VIII gene including HindIII, Bc1I and AlwNI were used for carrier detection. DNA extraction and PCR-RELP were also performed. Results The results revealed 3 heterozygote mothers for HindIII, 2 for Bc1I and 1 for AlwNI. We utilized these polymorphic sites for carrier analysis in these families. Ultimately, 4 carrier sisters of affected boys in this population were found; it was then possible to perform prenatal diagnosis procedure for their families. Conclusions HindIII and Bc1I polymorphisms can be suitable markers for hemophilia prenatal diagnosis in these two villages.