شناسايي، جداسازي و بررسي توالي پيشبراختصاصي بذر β- كانگلايسينين

Identification, isolation and sequence analysis of a β-Conglycinin seed specific promoter

پيشبرها يكي از عناصر كليدي مهندسي ژنتيك براي بيان هدفمند ژنها محسوب مي شوند. به طوريكه انواع مختلفي از پيشبرها با توجه به نوع بافت و يا ميزان بيان مي تواند مورد استفاده قرار بگيرند. يكي از پروتيين هاي ذخيره اي مهم در بذرهاي سويا پروتيين β- كانگلايسينين است كه طي توسعه بذر ساخته مي شود. سنتز پروتيين هاي ذخيره اي در ابتدا در سطوح رونويسي كنترل مي شود و بيان اختصاصي آنها در بذر، تحت كنترل نواحي پيشبري ژن هاي كد كننده پروتيين هاي ذخيره اي مي باشد. به علت مختص بذر بودن پروتيين β-كانگلايسينين انتظار مي رود كه پيشبر ژن آن نيز مختص بذر باشد در اين تحقيق جداسازي پيشبر مختص بذر β-كانگلايسينين از گياه سويا رقم بومي كتول صورت گرفت. پس از همسانه سازي پيشبر در ناقل pTZ57R/T و تعيين توالي آن، نواحي حفاظت شده مهم در اين پيشبر از قبيل جعبه TATA، جعبه CAAT و ساير موتيف هاي مختص بذر مانند عناصر تكراري SKn-1، عناصر تكراري RY، جعبه G، شناسايي شدند. سپس پيشبر β- كانگلايسينين به همراه سيگنال پپتيد مورد نظر و ژن دلتازيين، براي مطالعات بعدي در ناقل گياهي pBI121 همسانه سازي شد.