ارزيابي دو روش كونژوگاسيون كپسول پلي‌ساكاريدي هموفيلوس آنفلوانزا تيپ b با وزيكول غشاء خارجي نيسريا مننژيتيديس سر و گروه B

هموفيلوس آنفلوانزا تيپ b (Hib) يكي از علل اصلي مننژيت در نوزادان و كودكان در كشورهاي در حال توسعه است و هر ساله حداقل 3 ميليون مورد بيماري ناشي از Hib در سراسر جهان ايجاد مي‌شود. كپسول Hib، عامل اصلي بيماري‌زايي مي‌باشد. كپسول پلي‌ساكاريد كونژوگه شده به پروتئين حامل در پيشگيري از عفونت‌ها مؤثر است. واكسيناسيون عليه Hib تاكنون در برنامه واكسيناسيون معمول كشور قرار نگرفته است. هدف از اين مطالعه، دستيابي به يك روش كارآمد جهت توليد واكسن كونژوگه عليه مننژيت ناشي از هموفيلوس آنفلوانزا است. مواد و روش‌ها: در اين تحقيق، مشتق پلي‌ساكاريد Hib (PRP) در حضور 1-اتيل-3-(3-دي متيل آمينو پروپيل) كربودي‌ايميد (EDAC) با وزيكول غشاء خارجي (OMV) نيسريا مننژيتيديس گروه B كونژوگه شد. دو روش با واسطه آديپيك اسيد دي‌هيدرازيد (ADH) به‌عنوان فاصله‌گذار به‌كار برده شد. پلي‌ساكاريد به‌صورت جداگانه با سيانوژن برومايد (CNBr) و EDAC فعال شد. در روش اول، ADH به PRP فعال شده با CNBr متصل و مشتق PRPCNBr AH تشكيل شد. در روش دوم، ADH به PRP فعال شده توسط EDAC متصل و PRPEDAC AH تشكيل شد. دو مشتق ايجاد شده توسطEDAC به OMV كونژوگه شدند و PRPCNBr AH-OMV، PRPEDAC AH-OMV تشكيل شدند. نتايج: اين تحقيق نشان داد كه بازده كونژوگه PRPCNBr AH-OMV بر حسب پروتئين متصل شده به پلي‌ساكاريد 3/63% و براي PRPEDAC AH- 47% OMV. نتيجه‌گيري: متوسط بازده كونژوگاسيون توسط سيانوژن برومايد فعال‌كننده بيشتر از فعال‌كننده ديگري است. با اين حال به مطالعه بيشتر در مورد روش‌هاي ديگر و مقايسه آنها با يكديگر براي دستيابي به يك واكسن كونژوگه مؤثر، نياز است.

The Haemophilus influenzae type b (Hib) infection is a leading cause of meningitis in infants and children in the developing countries, estimated that at least three million serious cases of disease worldwide are caused by Hib each year. The capsular of Hib, is the most important cause of its virulence. The capsular polysaccharide conjugated to a carrier protein is effective in the prevention of such infections. The routine vaccination against Hib has not been defined in the national immunization program of Iran. The aim of this study was to achieve an efficient method for producing vaccines against meningitis caused by haemophilus influenzae. Methods: In this study, a derivative of Hib Polysaccharide (PRP) was conjugated to outer membrane vesicle (OMV) of Niesseria meningitides group B by 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) carbodiimide (EDAC). Two methods, involving adipic acid dihydrazide (ADH) as a linker, were used. The polysaccharide activated with cyanogen bromide (CNBr) and EDAC separately. The first, ADH was bounded to PRP activated with CNBr to form PRPCNBr AH, second ADH was bounded to PRP activated with EDAC to form PRPEDAC AH. These derivatives were bound to OMV by EDAC to form PRPCNBr AH-OMV and PRPEDAC AH-OMV. Results: On the basis of the bounded protein to polysaccharide, the yield of conjugated PRPCNBr AH-OMV and PRPEDAC AH-OMV were calculated 63.3% and 47%, respectively. Conclusion: The results indicated that average yield of conjugation with CNBr activator was higher than other activators, however more study required to other methods and comparing them together to achieve an effective conjugated vaccine.