بررسي اثر سميت زايي غشاء پلاكت قابل تزريق (IPM) در موش: يك گزارش كوتاه

Evaluation of Toxicity Test on Infusible Platelet Membrane in Mice: A Short Report

پلاكت هاي خون به طور كلي در بانكهاي خون به مدت 3 تا 5 روز نگهداري شده و در صورت عدم استفاده دور ريخته مي شوند. فراورده غشاء پلاكت قابل تزريقIPM: Infusible Platelet Membrane)) از پلاكت هاي تازه يا تاريخ گذشته انساني تهيه مي شود و كاهش زمان خونريزي در حيوان ترومبوسيتوپنيك نظير خرگوش را تصحيح مي نمايد. طبق استاندارهاي فارماكوپه اروپا جهت فراورده هاي دارويي زيستي از آزمايش تعيين سميت زايي استفاده شد و فراورده مورد آزمايش به موش تزريق مي گردد. در اين مطالعه بررسي اثر سميت زايي غير طبيعي فراورده IPM در مدل حيواني موش مورد ارزيابي قرار گرفت. مواد و روش ها در اين مطالعه تجربي جهت توليد فراوردهIPM، از پلاكتهاي تاريخ منقضي استفاده گرديد. ابتدا پلاكت آميخته شده و با اعمال روش ذوب و انجماد ليز گرديد. به منظور غير فعال كردن آلودگي هاي ويروسي و باكتريايي به مدت 20 ساعت با استفاده از پايداركننده سديم كاپريلات پاستوريزه شده و با ساكارز و سرم آلبومين انساني فرموله گشته ودر انتها ليوفيليزه گرديد. ميزان نيم ميلي ليتر از فراورده با غلظت 2 ميلي گرم در كيلوگرم به صورت داخل وريدي به 5 عدد موش سالم به وزن 17 تا 22 گرم تزريق گرديد. يافته ها مطابق قوانين فارماكوپه اروپا ظرف مدت 24 ساعت پس از تزريق اگر هيچيك از موش ها نميرند، فراورده مورد قبول واقع مي گردد و اگر بيش از يك موش بميرد آزمايش رد مي گردد و اگر فقط يك موش بميرد آزمايش تكرار مي گردد. همچنين، در آزمايش ما هر 5 موش زنده ماندند. نتيجه گيري دراين تحقيق نتايج نشان دادند فراورده IPM به عنوان يك جايگزين مناسب براي پلاكت ها در حيوان فاقد سميت زايي و ايمن بوده و امكان آن را دارد كه در مطالعات باليني مورد استفاده قرار گيرد و مي تواند بالقوه به عنوان جايگزين پلاكتي در آينده مصرف شود. با اين حال مطالعات بيشتري جهت تاييد جوانب مختلف ايمني آن نيز بايد انجام گيرد.

Blood platelet units are generally stored in blood banks for 3–5 days, afterwards they are discarded. Prepared infusible platelet membrane (IPM) from fresh or outdated human platelets correct the prolonged bleeding times in thrombocytopenic animals such as rabbits. Abnormal Toxicity is an European Pharmacopoeia standard for assessment of biological products and the test material is administered to the mice. In this study, abnormal toxicity of IPM was evaluated in experimental animal model such as mice. Materials an‎d Methods In this experimental study, infusible platelet membrane (IPM) was prepared from outdated platelet concentrates. Platelet concentrates were pooled, disrupted by freeze-thaw procedure, pasteurized for 20 hours to inactivate the possible viral or bacterial contaminants with a sodium caprylate stabilizer, formulated by sucrose and human serum albumin and finally lyophilized. We injected 0.5 ml of IPM (2 mg/kg) intravenously into each 5 health mice, weighing 17-22 grams. Results According to the EU Pharmacopeia, the test will be passed if none of animals die during 24 hours after injection. If more than one animal dies, the preparation fails the test. If one of the animals just dies, the test is repeated. In our experiment all five mice were alive. Conclusion In this research the results showed that IPM as a platelet substitute is free of abnormal toxicity and safe and it may be used in human clinical trial studies as a feasible approach to develop a platelet substitute in the future. However, further studies are required to confirm the different aspects of its safety as well.