بررسي اثر عصاره دي كلرومتاني ستاره شكننده گونه خليج فارس (Ophiocoma erinaceus) در القاء مرگ برنامه ريزي شده سلول بر رده سلولي EL4

Effect of the Persian Gulf Brittle Star (Ophiocoma erinaceus) Dichloromethane Extract on Induction of Apoptosis on EL4 Cell Line

فرآورده هاي طبيعي كانديد درماني نويد دهنده در درمان سرطان به شمار مي روند. ستاره شكننده از جمله خارپوستان داراي مواد فعال زيستي است. هدف از اين مطالعه، بررسي اثر عصاره دي كلرومتاني ستاره شكننده گونه خليج فارس (Ophiocoma erinaceus) در القاء مرگ برنامه ريزي شده سلول (مرگ برنامه ريزي شده سلول) بر رده سلولي EL4 بود. مواد و روش ها در اين مطالعه آزمايشگاهي سلول هاي لمفومايي در محيط كشت RPMI 1640 كشت داده شدند. بعد از 24 ساعت، سلول ها با غلظت هاي 5/7، 15، 31، 62، 125 و 250 ميكروگرم بر ميلي ليتر عصاره دي كلرومتاني ستاره شكننده تيمار شدند. سپس سميت سلولي و دوز موثره با آزمون دي متيل تيازول- دي فنيل تترازوليوم برومايد (MTT)، نوع مرگ سلولي القاء شده توسط آزمون هاي مربوطه و مسير القاء مرگ برنامه ريزي شده سلول توسط كيت كاسپاز 3 و 9 مطالعه شد. داده ها با استفاده از آناليز واريانس يك طرفه و آزمون تعقيبي TUKEY تجزيه و تحليل شدند. يافته ها نتايج نشان داد عصاره ستاره شكننده داراي سميت سلولي بر رده لمفومايي است. غلظت هاي پايين تر از 31 ميكروگرم بر ميلي ليتر سبب مهار تكثير و غلظت هاي بالاتر باعث تجزيه شدن سلول ها شد و غلظت ميانه مهاري آن حدود 31 ميكروگرم بر ميلي ليتر (05/ 0>p) تعيين گرديد. تست كاسپاز نشان داد نوع مرگ سلولي القاء شده توسط عصاره ستاره شكننده، مرگ برنامه ريزي شده سلول وابسته به كاسپاز است كه از طريق مسير دروني القاء كننده مرگ برنامه ريزي شده سلول در رده لمفومايي است. نتيجه گيري عصاره دي كلرومتاني ستاره شكننده از طريق القاء مرگ برنامه ريزي شده سلول، پيش برنده مرگ سلولي بر رده سلولي EL4 است و مي تواند به عنوان كانديد مناسبي جهت درمان سرطان خون پيشنهاد گردد.

The natural products are considered promising candidates for cancer treatment. Brittle stars are echinoderms that biologically include active compounds. The aim of this study was to evaluate the effect of the Persian Gulf brittle star (Ophiocoma erinaceus) dichloromethane extract on induction of apoptosis in the EL4 cell line. Materials an‎d Methods In this laboratory study, the lymphoma cells were cultured in RPMI 1640 medium. After 24 h, cells were treated with different concentrations (7.5, 15, 31, 62, 125 and 250 µg/ml) of brittle star dichloromethane extract. Then, cytotoxic effect and effective dose were studied using MTT assay (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide), further, cell death was induced by the relevant tests and apoptosis induction pathway was investigated by caspase 3 and 9 assay. Data were analyzed by one-way ANOVA followed by TUKEY's multiple comparisons test. Results The findings showed that the brittle star extract had a cytotoxic effect on Lymphoma cell line. So that lower concentrations of 31 µg/ml inhibited cell proliferation and higher concentrations of 31 µg/ml caused lysis of cells and the IC50 concentration was 31 µg/ml (p<0.05). The caspase colorimetric assay showed that apoptosis induced by brittle star extracts was caspase-dependent via intrinsic pathway on lymphoma cell line. Conclusion Brittle star dichloromethane extract promoted apoptosis in EL4 cells that proposed an innovative candidate for treatment of leukemia, altogether