مقايسه روش هاي متفاوت استخراج DNA از بافت هاي مختلف حلزون مخروطي دريايي Conus coronatus

Comparison of three different DNA extraction methods from different tissue samples of the marine cone snail, Conus coronatus

استخراج DNA ژنومي با كميت و كيفيت مطلوب از نيازهاي اساسي ژنتيك مولكولي است. اين مطالعه با هدف معرفي روش بهينه استخراج DNA از بافت هاي مختلف (عضله پا، سيفون و هارپن) حلزون دريايي Conus coronatus از شاخه نرم تنان با روش هاي فنل–كلروفرم، استات آمونيوم و (Cetyl trimethylammonium bromide) CTAB انجام شد. براي انجام اين مقايسه حدود 30 نمونه كونوس از سواحل پارك زيتون جزيره قشم جمع آوري شد. پس از تشريح نمونه ها در شرايط استريل، بافت هاي مختلف كونوس جداسازي و در اتانول 96% قرار داده شده و به آزمايشگاه منتقل گرديدند. استخراج DND از بافت هاي مختلف و با روش هاي متفاوت انجام شد. پارامترهاي كمي و كيفي با استفاده از دستگاه اسپكتوفتومتر و ژل آگارز 1% مورد ارزيابي قرار گرفت. نتايج نشان داد كه بالاترين كيفيت DNA استخراجي در روش استات آمونيوم بوده و باندهاي حاصل روي ژل فاقد آلودگي بودند و DNA استحصالي از بافت عضله پا داراي بهترين كيفيت و كميت بود.

Genomic DNA extraction with high quantity and quality is the basic necessities of molecular genetic studies. The aim of this study is the applicability of different DNA extraction methods as the easiest and fastest methods for and their efficiency with different tissue qualities (foot, siphon, harpoon) from marine cone snail Conus coronatus, Mollusca with Phenol-chloroform, Ammonium acetate and CTAB (Cetyl trimethylammonium bromide) methods. About 30 samples were collected from Qeshm Island, Zeyton Park. After dissection on sterile condition, different kinds of Conus tissues were separated and preserved in ethanol 96%, then transferred to the lab. DNA extractions were performed from different tissues with different methods. Spectrophotometer and electrophoresis on 1 % agarose gel were used for evaluating the quality and quantity of extracted DNA samples. According to the results, Ammonium acetate method showed sharper bands, without esmire in comparison with other extraction methods and DNA extracted from foot tissue had the best quality and quantity