بررسي اثر اسانس بنه (Pistacia atlantica Desf. ) بر روي ليشمانيا ماژور در شرايط In vivo و In vitro

A study on the effects of Pistacia atlantica Desf. essential oil on Leishmania major in vitro and in vivo

ليشمانيوز جلدي از بيماري‌هاي اندميك و شايع در بعضي از نقاط كشورمان مي‌باشد. استفاده از تركيب‌هاي آنتي‌موان پنج ظرفيتي به‌عنوان داروهاي خط اول درمان ليشمانيازيس جلدي همراه با محدوديت‌ها و عوارض جانبي متعدد است. داروهايي با منشأ گياهي مي‌توانند جايگزين مناسبي باشند. به همين منظور در اين پژوهش تأثير اسانس بنه (Pistacia atlantica Desf.) كه از گياهان بومي كشور است بر رشد ليشمانياي ماژور در شرايط in vivo و in vitro بررسي شد. ابتدا اسانس بنه با رقت‌هاي mg/ml 1.50 تا 1.3200 بر پروماستيگوت‌هاي ليشمانياي ماژور، ماكروفاژهاي غير آلوده و ماكروفاژهاي آلوده به آماستيگوت انگل در شرايط in vitro با آزمون‌هاي MTT و فلوسايتومتري بررسي شد. ميزان دوز مؤثر IC50 بر روي پروماستيگوت‌هاي سوش استاندارد ليشمانيا ماژور (MRHO/IR/75/ER)، مشخص گرديد. اسانس بنه به‌صورت پمادي براي درمان استفاده شد. سپس موش‌هاي نژاد BALB/c به 3 گروه 5تايي تحت درمان با اسانس بنه به‌صورت پمادي و گروه درمان با گلوكانتيم به‌صورت تزريقي و گروه كنترل بدون درمان چهار هفته درمان، يك‌بار در روز در يك زمان مشخص انجام شد و براي بررسي ميزان تأثير دارو هر هفته قطر زخم، وزن موش‌ها و ميزان مرگ و مير موش‌ها بررسي شد. به‌طوري كه اسانس به‌صورت پمادي از افزايش قطر زخم‌ها جلوگيري كرد. نتايج فلوسايتومتري نشان داد كه بنه توانست در 10% پروماستيگوت‌ها ايجاد آپوپتوز كند. نتايج بدست‌آمده نشان داد اسانس بنه در از بين بردن ليشمانياي ماژور در ماكروفافاژ و محيط كشت فعاليت ضد ليشمانيايي مطلوبي دارد. همچنين ميزان بقاء موش‌هايي كه تحت درمان قرار گرفتند با گروه كنترل اختلاف معني‌داري داشت.

Cutaneous leishmaniasis is one of the endemic and common diseases in many parts of our country. The use of pentavalent antimony compounds as first-line drugs for the treatment of cutaneous leishmaniasis have several limitations and side effects. Hence the herbal drug can be good alternatives. In the present study, the effect of essential oil of Pistacia atlantica Desf. on the growth of Leishmania major was investigated in in vivo and in vitro conditions. Initially, the essential oil of Pistacia atlantica with dilution of 1:50 to 1:3200 was evaluated on the promastigotes of Leishmania major, non-infected macrophages, and infected macrophages with amastigotes, in in vitro with MTT and flow cytometry tests. Also, the IC50 of the essential oil on the promastigotes of the Leishmania major (MRHO/IR/75/ER) was calculated. The ointment of Pistacia atlantica essential oil was used for treatment in in vivo condition. BALB /c mice were divided into three groups and in each group five mice including treated group with ointment of essential, treated group with glucantime and non-treated control group. The treatment was performed daily and once a day for four weeks. To assess the effect of the drugs, the wound diameter and weight and the mortality rate of the mice were measured every week. The ointment of Pistacia atlantica essential oil could inhibit the wounds diameter caused by Leishmania major. The flow cytometry results showed that Pistacia atlantica essential oil could create 10% apoptosis in the treated promastigotes. Overall, Pistacia atlantica essential oil was effective in eliminating the amastigotes of Leishmania major in the macrophages and culture media, and also the survival rate differences of treated mice and control group were significant.