بررسي ميزان توزيع ژن هاي blaCTX-M و blaTEM در سويه هاي پروتئوس مولد ESBL جدا شده از عفونت هاي مجاري ادراري در ايلام

Distribution of blaCTX-M, blaTEM genes among ESBL producing Proteus species isolated from urinary tract infections (UTI) in Ilam

سابقه و هدف: توليد آنزيم­هاي بتالاكتاماز وسيع‌الطيف، مهم‌ترين عامل مقاومت به آنتي‌بيوتيك­هاي بتالاكتام در ميان باكتري‌هاي گرم منفي است.هدف از اين تحقيق، تعيين الگوي حساسيت آنتي‌بيوتيكي سويه‌هاي پروتئوس جدا شده از عفونت‌هاي مجاري ادراري در ايلام و بررسي وجود ژن‌هاي blaTEM ,blaCTX-M در آن‌ها بود. روش بررسي: در اين پژوهش تعداد 200 نمونه ادرار از بيماران مبتلا به عفونت مجاري ادراري كه كشت آنها مثبت بود از مراكز درماني ايلام جمع‌آوري وبه وسيله آزمايش‌هاي روتين بيوشيميايي و ميكروبيولوژي شناسايي شدند. سپس الگوي مقاومت آنتي‌بيوتيكي و ميزان MIC سويه‌هاي پروتئوس جدا شده تعيين و از نظر وجود (فراواني) ژن­هاي blaCTX-M و blaTEM مورد بررسي مولكولي قرار گرفتند. يافته‌ها: از 200 نمونه مورد مطالعه، ميزان 60درصد از خانم­ها و 40درصداز آقايان جدا شد. در اين بررسي تعداد 25 سويه (5/12درصد) آلوده به پروتئوس بودند كه بيش­ترين ميزان آلودگي مربوط به محدوده سني 21 تا30سال(40 درصد) بود. از 25 سويه پروتئوس جدا شده 18 سويه(72درصد) پروتئوس ميرابيليس، 6 سويه(24درصد) پروتئوس ولگاريس و يك سويه (4درصد) پروتئوس رتگري تشخيص داده شد. پس از تعيينMIC و الگوي مقاومت آنتي‌بيوتيكي سويه‌ها، با روش فنوتيپي 12 سويه(48درصد) مولد ESBL شناخته شدند كه 12 سويه(48درصد) به سفتازيديم، 10 سويه(40درصد) به سفوتاكسيم و 8 سويه(32درصد) به سيپروفلوكساسين مقاوم بودند، با روش تاييد ديسك تركيبي 10 سويه مولد ESBL بودند. نتايج بررسي مولكولي نشان داد كه 10 سويه (40درصد) داراي ژن blaTEMو 8 سويه (32درصد) حاوي ژن blaCTX-M بودند. نتيجه‌گيري: به نظر مي‌رسد ميزان مقاومت به سفالوسپورين‌هاي نسل سوم در اين سويه‌ها زياد وجاي نگراني دارد و انجام دقيق آزمايش‌هاي آنتي بيوگرام قبل از تجويز آنتي بيوتيك در عفونت‌هاي ناشي از ارگانيسم‌هاي توليدكننده ESBL يك ضرورت اجتناب ناپذير است.

Background: The ESBL enzymes producing, is the most important resistance factor against ß-lactam antibiotics among gram-negative bacteria family. The aim of this study was the evaluation of antimicrobial susceptibility pattern of proteus species isolated from UTI in Ilam, and detection of blaCTX-M and blaTEM genes in these species. Materials and Methods: Out of 200 urine samples, those were culture positive, were collected from medical centers in Ilam city. All samples were determined using routine biochemical and microbiological diagnosis tests. Proteus isolates were selected for determining of antibiogram profiles, MIC and also persistent (frequency) of blaCTX-M and blaTEM genes by PCR method. Results: Total of 200 urine samples, 120 samples (60%) were collected from women and 80 samples (40%) were collected from men. Among samples tested 25 samples (12.5%) were found to be proteus species. The highest rate of contamination was related to age ranges of 21-30 years old (40%). proteus species was subjected for determining of MIC and antibiogram profile and then using phonotyping method 12 isolates (48%) were found to be ESBL producing, those 12 species (48%) were resistant to Ceftazidime, 10 species (40%) were resistant to Cefotaxime and 8 species (32%) were resistant to Ciprofloxacin. Using double disc synergy test (DDST), totally 10 species (40%) were found as ESBL, and molecular detection of species using PCR showed that 10 species (40%) have had blaTEM gene and 8 species (32%) were containing of blaCTX-M gene. Conclusion: In regard to high percentage of resistance to 3rd generation of cephalosporins, performance of exact antibiogram test, to detect ESBL producing species in infection caused by these organisms before antibiotic therapy is necessary.