بررسي نقش PKCγ نخاعي در تحمل و هيپرآلجزياي القا شده بدنبال تجويز مكرر مورفين در موش‌هاي صحرايي نر

The Role of Spinal PKCγ in Tolerance and Hyperalgesia Induced by Repeated Morphine Administration in Male Rats

زمينه: اپيوييدهايي مثل مورفين يك انتخاب خوب براي درمان دردهاي حاد و مزمن در كلينيك مي‌باشند. استفاده كلينيكي از داروهاي اپيوئيدي جهت تسكين درد داراي محدوديت است. زيرا تكرار تجويز آنها منجر به ايجاد تحمل و وابستگي فيزيكي و كاهش potency دارو مي‌شود. هدف از اين مطالعه بررسي نقش (PKCγ)Protein Kinase Cγ در تحمل و هيپرآلجزياي القا شده به‌دنبال تجويز مكرر مورفين در موش‌هاي صحرايي نر است. مواد و روش‌ها: جهت آزمايش، موش‌ها به 4 گروه 6 تايي تقسيم شدند. گروه‌ها شامل: تزريق سالين، تحمل به مورفين و هيپرآلجزيا، متفورمين، تحمل و هيپرآلجزياي القا شده به مورفين + متفورمين بودند. ابتدا مورفين 10 ميلي‌گرم به ازاي هر كيلوگرم و به‌صورت زير جلدي يك مرتبه در روز و به مدت 14 روز تزريق شد. تست رفتاري هارگريوز به‌ترتيب قبل (كنترل) و بعد از تزريق اولين دوز مورفين در روز اول و سپس روز 14 پس از آخرين تزريق براي بررسي تحمل انجام گرفت. در بررسي هيپرآلجزيا تست رفتاري قبل از تزريق اولين دوز مورفين و سپس قبل از آخرين تزريق آن در روز 14 و آنگاه دو روز پس از آخرين تزريق يعني روز 16 صورت گرفت. بيان (PKCγ) نخاعي در روزهاي 14 پس از آخرين تزريق و روز 16 بروش وسترن بلات سنجيده شد. متفورمين به ميزان 100 ميلي‌گرم به ازاي هر كيلوگرم به صورت داخل صفاقي همراه با مورفين به مدت 14 روز تزريق گرديد. سنجش تست رفتاري هارگريوز و ميزان بيان PKCγ با همان روشي كه در بالا اشاره شد صورت گرفت. يافته‌ها: نتايج تحمل معني‌داري را در روز 14پس از تزريق آخرين دوز مورفين و القاي هيپرآلجزيا را در روزهاي 14 قبل از تزريق مورفين و 16 در مقايسه با كنترل نشان داد. همچنين افزايش معني‌داري در بيان PKCγ در روز 14 و روز 16 در مقايسه با كنترل ديده شد كه اين افزايش در تحمل بيشتر از هيپرآلجزيا بود. تزريق 14روزه متفورمين به همراه مورفين سبب كاهش معني‌دار تحمل و هيپرآلجزيا گرديد. بيان PKCγ نخاعي نيز در تحمل و هيپرآلجزيا كاهش يافت. نتيجه‌گيري: نتايج نشان داد كه افزايش بيان PKCγ نخاعي در تحمل و القاي هيپرآلجزياي حاصل از استفاده مكرر مورفين مي‌تواند نقش داشته باشد.

Background: The aim of this study was to investigate the possible role of Protein Kinase Cᵧ (PKCᵧ) in morphine tolerance and induced hyperalgesia following repeated morphine administration in male rats. Material and Methods: Rats were divided into 4 groups for testing. The groups consisted of control (saline), morphine tolerance and hyperalgesia, metformin, morphine tolerance and hyperalgesia + metformin. First morphine (10mg/kg, s.c) administrated daily up to 14 days subcutaneously. Hargreaves' behavioral test was performed to evaluate morphine tolerance. The test was ececuted before morphin injection and the results considered as “control” .Then the test repeated after the first dose of morphine on the first day and then on day14th after the last injection. To consider morphine hyperalgesia PWL (Paw Withdrawal Latency) was measured by Hargreaves test before and after first morphine injection on the first day and then on day 14th before the last injection of morphine and on day16th two days after the last injection of morphine. The expression of spinal PKCᵧ measured on day 14th and 16th. Metformin 100mg/kg, co-administrated with morphine daily up to 14 days then PWL and PKCᵧ expression were assessed as mentioned above. Results: The results showed a significant tolerance and hyperalgesia on day 14th and 16th compareed to control. PKCᵧ expression also increased significantly on day 14th and 16th compareed to control. However, there was no significant difference in comparison between day 14th and day 16th. Co-administration of metformin and morphine up to 14 days increased PWL in morphine tolerance and reduced hyperalgesia and PKCᵧ expression. Conclusion: The results showed that increasing of spinal PKCᵧ expression in chronic morphine administration might be involved in morphine tolerance mechanism and induced hyperalgesia.