عنوان مقاله :
بررسي وجود ژن سم شيگا در جدايه‌هاي كلينيكي گونه‌هاي شيگلا از گذشته تا حال در بوشهر
عنوان به زبان ديگر :
Presence of Shiga Toxin Gene in Clinical Iso-lates of Shigella Species from the Past to Present in Bushehr, Iran
پديد آورندگان :
نورآبادي، غزل دانشگاه علوم پزشكي بوشهر - دانشكده پزشكي , سياوشي، مژگان دانشگاه علوم پزشكي بوشهر - دانشكده پزشكي , وحدت، كتايون دانشگاه علوم پزشكي بوشهر - دانشكده پزشكي , غريبي، اميد دانشگاه علوم پزشكي بوشهر - دانشكده پزشكي , محمودپور، مهدي دانشگاه علوم پزشكي بوشهر - دانشكده پزشكي , حقيقي، محمدعلي دانشگاه علوم پزشكي بوشهر - دانشكده پزشكي
كليدواژه :
PCR , ژن stx , شيگا توكسين , شيگلا
چكيده فارسي :
زمينه: سيتوتوكسين شيگا (Stx) عامل بيماري شديد روده‌اي در انسان است. اخيراً ژن stx درگونه‌هاي ديگر غير از شيگلا ديسنتري تايپ 1 يافت شده است. هدف اين مطالعه، شناسايي ژن stx در جدايه‌هاي كلينيكي جدا شده از دو شيوع قبلي بيماري شيگلوز در شهر بوشهر واقع در در جنوب غربي ايران مي باشد.
مواد و روش‌ها: با روش PCR، حضور ژن‌هاي stx و ipaH در DNA خالص شده از 143 جدايه شيگلا بررسي شد. ترادف‌هاي تعدادي از محصول‌هاي PCR، در گونه‌هاي مختلف شيگلا، با پرايمرهاي (evt) مشابه به كار رفته در تكثير اين بخش تعيين گرديد.
يافته‌ها: چهارده (3/22 درصد) از 63 جدايه شيگلا مربوط به شيوع شيگلوز در فاصله 83-1381، داراي پاسخ PCR مثبت با پرايمرهاي evt بودند. نتايج تعيين ترادف مشخص كرد، محصول PCR ناحيه evt بيشترين شباهت (97 درصد) را با زير واحد A از سم شيگلا ديسانتري داشت. نتايج PCR پرايمرهاي stx و evt در كليه جدايه‌هاي كلينيكي شيگلاي جدا شده در فاصله 94-1392 منفي بودند. نتايج آزمايش PCR نشان داد كه ژن ipaH در كليه جدايه‌ها وجود داشت. بر اساس آزمايش‌هاي بيوشيميايي و آنتي سرم‌هاي اختصاصي گونه شيگلا، جدايه‌هاي حمل كننده ژن stx، شامل 9(3/14 درصد) شيگلا فلكسنري، 4(4/6 درصد) شيگلا سونه‌اي، 1(6/1 درصد) شيگلا بوييدي بودند.
نتيجه‌گيري: ژن stx از قبل در گونه‌هاي مختلف شيگلاهاي منطقه بوشهر پراكنده شده است. به هر حال نبود اين ژن در جدايه‌هاي كلينيكي آخرين شيوع شيگلوز ممكن است مقطعي باشد. به‌دليل اهميت ژن stx در افزايش پتانسيل بيماريزايي شيگلا، ضروري است پايش وجود اين ژن با روش‌هاي ملكولي در آينده پيگيري شود.
چكيده لاتين :
Background: The Shiga cytotoxin (Stx) is involved in serious human intestinal diseases. Recently stx has been found in non-S dysenteriae1 Shigella species. This study aimed to identify stx gene in clinical strains of Shigella isolated from two shigellosis outbreaks in previous years in Bushehr, southwest of Iran.
Materials and Methods: Purified DNA of 143 Shigella isolates was used for PCR to detect stx and ipaH genes. The number of PCR products in various Shigella species isolates was sequenced with the same primers (evt) used to amplify this region.
Results: Fourteen (22.3%) out of 63 shigella isolates related to previous shigellosis outbreaks during 2002-2004 contained the PCR positive result with evt primers. The sequencing results indicated that the evt PCR product had the most identity (97%) with Shigella dysentery shiga toxin subunit A. All clinical shigella strains isolated during 2013-2015 yielded PCR negative results with primers stx and evt. PCR results revealed that ipaH was present in all isolates. According to biochemical and species-specific antiserum tests, the stx gene harboring isolates included 9 (14.3%) S. flexneri, 4 (6.4%) S. sonnei, and 1(1.6%) S. boydii.
Conclusion: The stx gene has already been distributed in different Shigella species of Bushehr region. However, the absence of this gene in the clinical isolates of recent shigellosis outbreaks may be temporary. Because stx gene increases the pathogenic potential of Shigella, it is necessary to monitor the prevalence of the stx harboring Shigella species by molecular methods in the future.
