اثر مكمل غذايي رافينوز، لاكتوباسيلوس اسيدوفيلوس و تركيب دو مكمل بر بيان ژن‌هاي درگير در ايمني غيراختصاصي ليزوزيم و TNF-α در ماهي كپور معمولي (Cyprinus carpio)

The effect of retene and Lactobacillus acidophilus on non specific immune related gene expression in carp (cyprinus carpio)

هدف از اين تحقيق ارزيابي اثرات رافينوز، لاكتوباسيلوس اسيدوفيلوس و تركيب اين دو مكمل به عنوان سين‌بيوتيك بر بيان ژن-هاي درگير در ايمني ليزوزيم (Lyzozym) و TNF-α ماهي كپور معمولي بود. تعداد 12 قطعه ماهي با ميانگين وزني 5/2±10 گرم در هر تانك (500 ليتري) ذخيره‌سازي شد. ماهي‌ها با سطوح 2 درصد رافينوز، 108×6 CFU/g از باكتري لاكتوباسيلوس اسيدوفيلوس، تركيب دو مكمل و گروه شاهد نيز با غذاي فاقد مكمل به مدت 8 هفته تغذيه شدند. به‌منظور بررسي بيان ژن‌ ليزوزيم از بافت پوست نمونه‌برداري انجام شد. RNA از بافت مورد مطالعه استخراج و cDNA سنتز شد و با آغازگرهاي اختصاصي توسط Real Time PCR بيان ژن‌هاي مذبور بررسي شد. نتايج نشان داد كه لاكتوباسيلوس اسيدوفيلوس تاثير قابل ملاحظه‌اي روي بيان ژن ليزوزيم داشت ( 05/0 > P ) كه اختلاف معني‌داري با ساير تيمارها داشت ولي بين تيمارهاي پربيوتيك‌، سين‌بيوتيك و شاهد اختلاف معني‌داري وجود نداشت. ( 05/0 < P ) همچنين اختلاف معني‌داري در بيان ژن TNF-α بين تيمارهاي پروبيوتيكي، پربيوتيكي و گروه شاهد وجود نداشت ( 05/0 < P ) و كترين بيان اين ژن در گروه‌هاي تغذيه شده با سين بيوتيك مشاهده شد. در اين مطالعه مشخص گرديد كه لاكتوباسيلوس اسيدوفيلوس باعث افزايش ايمني به‌واسطه افزايش بيان نسبي ليزوزيم در ماهي كپور معمولي مي‌شود.

The aim of this study was to evaluate the effects of retene and Lactobacillus acidophilus on expression of immune-related Lyzozym and TNF-α genes in carp (Cyprinus carpio). 12 fish with an average weight of 10 ± 2/5 gr per 500-liter tank were storage. Fish were fed three levels 2% retene, 6×108 CFU/g of L. acidophilus, the combination of these supplement and control groups without probiotic an prebiotic for 8 weeks. To investigate the Lyzozyme and TNF-α gene expression from skin tissue sampling was done at the end of trial. RNA was extracted from subject tissue and cDNA was synthesized and by using specific primers via Real Time PCR, Lyzozyme and TNF-α gene expression was examined. The results showed that L. acidophilus had significant effect on Lyzozyme gene expression ( P < 0.05 ). Also the result of gene expression showed that there were no remarkable differences among groups fed prebiotic, synbiotic and non supplemented diet ( P > 0.05 ) while these supplements had no significant effect on TNF-α gene expression ( P > 0.05 ) and the lower gene expression was observed in symbiotic treat. This study showed that L. acidophilus increased immunity due to increasing the relative expression of Lyzozyme in carp.