تاثير ژل رويال بر تمايز سلول هاي بنيادي به سلولهاي شبه عصبي در شرايط آزمايشگاهي

An Evaluation of the Influence of Royal Jelly on Differentiation of Stem Cells into Neuronal Cells Invitro

سابقه و هدف: سلول­هاي بنيادي كارسينومايي 19P توانايي تمايز به سلولهاي سه لايه جنيني را دارند. از آنجائيكه سلولهاي تمايز يافته مي توانند باعث كاهش عوارض ناشي از بيماريهاي تحليل برنده سيستم عصبي شوند. لذا اين تحقيق با هدف بررسي تمايز سلولهاي بنيادي P19 به سلولهاي عصبي تحت تاثير ژل رويال صورت گرفت. مواد و روش­ها: در اين مطالعه بنيادي-كاربردي اجسام شبه جنيني حاصل از كشت معلق سلولهاي P19 به ظرفهاي ژلاتينه منتقل شده و سپس در شش گروه با غلظتهاي 25، 50، 100، 150، 200 و 300 mg/ml ژل رويال قرار گرفتند. براي هر گروه پنج خانه در نظر گرفته شد. بررسي مورفولوژي سلولهاي تمايز يافته با استفاده از رنگ آميزي اختصاصي كرزيل ويوله انجام گرفت. رديابي بيان پروتئينهاي ويژه سلولهاي عصبي مانند سيناپتوفيزين و بتاتوبولين III با استفاده از ايمنوفلورسنس انجام شده و نتايج مورد بررسي قرار گرفت. يافته­ ها: بر اساس نتايج بدست آمده سلولهاي تيمار شده با ژل رويال به رنگ آميزي اختصاصي سلولهاي عصبي پاسخ مثبت دادند. ميانگين درصد تمايز سلولي در غلظتهاي مختلف ژل رويال به طور معني داري بيشتر از گروه كنترل منفي (با ميانگين درصد تمايز سلولي2/3±9) بوده است. بالاترين درصد تمايز سلولي در گروههاي تيمار شده با غلظتهايmg/ml 200و300 با ميانگين در صد تمايز سلولي (4/8±98 و 2/2±99/3) مشاهده شد (0/05 >p). ميانگين درصد سلولهاي تمايز يافته گروه تيمار با غلظت 200 mg/ml تفاوت معني داري با گروه تيمار با غلظت 300 mg/ml نداشت. نتيجه گيري: نتايج اين مطالعه نشان داد كه سلولهاي P19 توانايي تمايز به سلولهاي عصبي را دارند و مي توانند به عنوان منبعي در سلول درماني بيماريهاي عصبي استفاده شوند.

BACKGROUND and OBJECTIVE: P19 carcinoma stem cells are able to differentiate into embryonic cells with three germ layers. Given the fact that differentiated cells can reduce complications associated with degenerative diseases of the nervous system, in this study, we aimed to investigate the differentiation of P19 stem cells into neuronal cells under the influence of royal jelly. METHODS: In this basic-applied research, embryoid bodies, prepared in P19 cell suspension culture, were transferred to gelatinized containers and classified in six groups, receiving 25, 50, 100, 150, 200, and 300 mg/ml of royal jelly, respectively; five wells were allocated to each group of cells. Morphological evaluation of cell differentiation was performed via cresyl violet staining. Also, immunofluorescence technique was used to track the expression of neuronal marker proteins such as synaptophysin and β-tubulin III. Finally, the findings were analyzed. FINDINGS: The present findings showed that cells exposed to royal jelly responded positively to specific staining of nerve cells. In groups receiving different concentrations of royal jelly, the mean percentage of cell differentiation was significantly higher than the negative control group (9±2.3). The highest percentage of cell differentiation was observed in groups treated with 200 and 300 mg/ml of royal jelly, respectively (98±4.8 and 99.3±2.2, respectively) (p<0.05). Based on the findings, the mean percentage of cell differentiation in the group receiving 200 mg/ml of royal jelly was not significantly different from the group receiving a concentration of 300 mg/ml. CONCLUSION: The results of the present study showed that P19 cells are able to differentiate into neuronal cells, and therefore, they could be used in cell-based therapy for neurological diseases.