جهش‌هاي ژرم‌لاين اگزون‌ 2 پروتوآنكوژن RET در جمعيت ايراني مبتلا به كارسينوماي مدولاري تيروئيد

Germline mutations of RET proto-oncogene exon 2 in iranian population with medullary thyroid carcinoma

سابقه و هدف: كارسينوماي مدولاري تيروئيد(Medullary thyroid carcinoma,MTC) 5-10% كل انواع سرطان‌هاي تيروئيد بوده كه ﺗﻮارث آن به صورت اﺗﻮزوم بارز مي‌باشد. ارتباط جهش اگزون‌هاي 16-10 پروتوآنكوژن RET با MTC به‌خوبي نشان داده شده است. از آن‌جايي‌كه بررسي ساير اگزون‌هاي اين ژن كم‌تر مورد توجه بوده است، هدف از مطالعه حاضر تعيين فراواني جهش‌هاي ژرم‌لاين اگزون2 پروتوآنكوژن RET در بيماران مبتلا به MTC در جمعيت ايراني بود. مواد و روش‌ها: در اين مطالعه 223 نفر (125 بيمار و 98 نفر اعضاي خانواده) مورد بررسي قرار گرفتند. محتواي DNA ژنومي با روش استاندارد نمك اشباع/پروتئيناز كا استخراج شد. اگزون 2 و نواحي اينترون اطراف آن با روش واكنش زنجيره‌اي پلي‌مراز (PCR) تكثير شدند و تعيين ژنوتيپ با روش تعيين توالي مستقيم DNA انجام شد. يافته‌ها: در پژوهش حاضر تغييرات نوكلئوتيدي c135G>A/A45A (rs1800858) در اگزون2،c.337+9G>A (rs2435351) و c.337+137G>T (rs2505530) در اينترون2 ژن RET يافت گرديد. در ميان بيماران و خويشاوندان، بيش‌ترين و كم‌ترين فراواني ژنوتيپي و آللي به‌ترتيب مربوط به c.337+137G>T (rs2505530) و c135G>A/A45A (rs1800858) بود. بين تغييرات نوكلئوتيدي يافت شده و نوع فنوتيپ بيماري، جنسيت و قوميت رابطه‌ي معني‌داري يافت نشد. نتيجه‌گيري: جهشي كه منجر به تغيير اسيدآمينه در اگزون2 و يا جايگاه پيرايش اينترون يك-اگزون2 (GT) و اگزون2-اينترون2 (AG) شود، يافت نگرديد. به نظر نمي‌رسد بررسي وجود جهش در اگزون2 اين ژن در بيماران مبتلا به MTC داراي اهميت باشد. با اين وجود، بررسي ارتباط واريانت‌هاي يافته شده با وجود يا عدم وجود ساير جهش‌ها در اگزون‌هاي اصلي ژن RET و هم‌چنين يافتن هاپلوتايپ‌هاي احتمالي در ارتباط با بيماري توصيه مي‌شود

Introduction: Medullary thyroid carcinoma (MTC) accounts for 5-10% of all thyroid cancers andit is inherited in autosomal dominant pattern. Association of RET proto-oncogene mutations in exons 10-16 with MTC is well recognized. Since less attention has been paid to the study of other exons within the same gene, therefore, the aim of this study was to determine the frequency of germ line mutations in exon 2 of the RET proto-oncogene in patients with MTC in Iranian population. Materials and Methods: There were 223 subjects (125 patients and 98 family members) were participated n this study. Genomic DNA was extracted using standard salting out/proteinase K method. The exon2 and exon-intron boundaries were amplified by using Polymerase Chain Reaction (PCR) and the direct DNA sequencing method was used for genotype analysis. Results: The nucleotide changes c135G>A/A45A (rs1800858) in exon 2 and c.337+9G>A (rs2435351) and c.337+137G>T (rs2505530) were found in intronic region of RET gene. Among patients and relatives, the most and least genotype and allele frequencies were c.337+137G>T (rs2505530) and c135G>A/A45A (rs1800858), respectively. Also we did not find any significant correlation between detected nucleotide changes and disease phenotype, gender and ethnicity. Conclusion: No mutation was detected leading to change in amino acid sequences in exon 2 or in exon-intron splice sites. However, further studies are recommended to identify the probable correlation between detected variations and presence or absence of other mutations in other RET main exons, and also to find haplotype association with the disease.