عنوان مقاله :
طراحي يك روش سريع و دقيق براي انتقال و كشت باكتري‌هاي سخت رشد كمپيلوباكتر ژژوني و كمپيلوباكتر كلي از كودكان داراي علائم گاستروانتريت باكتريايي
عنوان به زبان ديگر :
Designing a rapid and accurate method for transportation and culture of the Campylobacter jejuni and Campylobacter coli-fastidious bacteria in the children with bacterial gastrointestinal symptoms
پديد آورندگان :
شمس، سعيد دانشگاه تربيت مدرس -دانشكده علوم پزشكي - گروه باكتري شناسي پزشكي، تهران , بخشي، بي تا دانشگاه تربيت مدرس -دانشكده علوم پزشكي - گروه باكتري شناسي پزشكي، تهران , نيك متش، بهرام دانشگاه علوم پزشكي تهران - مركز تحقيقات زئونوز، تهران
كليدواژه :
كمپيلوباكتر ژژوني , كمپيلوباكتر كلي , كري , بلير , Duplex-PCR , گاستروانتريت
چكيده فارسي :
سابقه و هدف: گونه‌هاي كمپيلوباكتر عامل عمده موارد گاستروانتريت باكتريايي با عنوان كمپيلوباكتريوز در سرتاسر جهان مي‌باشند. از تظاهرات مهم بعد از اين عفونت سندرم گيلن باره و آرتريت واكنشي مي‌باشند. علي‌رغم اهميت عفونت، جداسازي اين باكتري‌هاي سخت رشد در آزمايشگاه‌هاي باليني انجام نمي‌شود. هدف از اين مطالعه طراحي يك محيط انتقالي تغييريافته با mCCDA و ارزيابي مدت زمان زنده ماندن باكتري، بهينه‌سازي شرايط كشت و انجام Duplex-PCR روي كلني‌ها و نمونه‌هاي مستقيم مدفوع و مقايسه نتايج با كشت مي‌باشد.
مواد و روش‌ها: تعداد 58 كودك مشكوك به كمپيلوباكتريوز وارد مطالعه شدند. نمونه‌هاي مدفوع در عمق محيط انتقالي تغييريافته با mCCDA قرار گرفته و سپس به آزمايشگاه منتقل شدند. كشت از محيط انتقالي بر روي دو محيط mCCDA و بروسلا آگار هر 24 ساعت و تا 7 روز انجام شد و پليت‌ها تا 72 ساعت از نظر رشد باكتري مورد ارزيابي قرار مي‌گرفتند. Duplex-PCR مستقيم روي كلني‌ها و نمونه‌هاي مدفوع نيز انجام شد.
يافته‌ها: تعداد باكتري‌هاي ايزوله شده در اين مطالعه 9 مورد (16%) بود كه بعد از 48 تا 72 ساعت روي محيط‌هاي كشت قابل مشاهده بودند. هم‌چنين با استفاده از Duplex-PCR روي كلني‌ها تعداد 8 ايزوله كمپيلوباكتر ژژوني و 1 ايزوله كمپيلوباكتر كلي تائيد شد. نتايج Duplex-PCR مستقيم روي نمونه بيماران و نتايج كشت نيز با هم يكسان بودند.
نتيجه‌گيري: نتايج نشان داد كه روش ارائه شده در اين مطالعه با حساسيتي برابر با PCR مناسب براي جداسازي گونه‌هاي كمپيلوباكتر مي‌باشد. به نظر مي‌رسد كه با استفاده از اين محيط انتقالي تغييريافته و بهينه‌سازي شرايط كشت مي‌توان اين باكتري‌هاي سخت رشد را بهتر از محيط انتقالي پايه ايزوله نمود
چكيده لاتين :
Introduction: Campylobacter spp. is the major cause of bacterial gastroenteritis, called campylobacteriosis, in the worldwide. Post-infectious complications of this infection are reactive arthritis and Guillain–Barré syndrome. Despite the importance of this infection, the isolation of fastidiousbacteria cannot be performed in most clinical laboratories. The aim this study was to design an alternative transport medium with mCCDA and evaluation the bacteria survival time into this medium, optimization of culture conditions of bacteria and then performance of direct duplex-PCR on colonies and stool samples. Finally, the results of the PCR and culture were compared.
Materials and Methods: Fifty eight children suspected to campylobacteriosis were enrolled in this study. Fecal specimens were inoculated in depth inside the altered transport medium with mCCDA and then sent to laboratory. The specimens from transport media were cultured on two media of mCCDA&brucella agar daily and up to 7 days. Each plate was evaluated for bacterial growth up to 72 hours. The duplex-PCR on colonies and stool were carried out directly.
Results: Total of isolated bacteria in this study was 9 cases (16%). The colonies were visible on the media after 48 to 72 h. The duplex-PCR assay on colonies detected 8 isolates of C. jejuni and 1 isolate C. coli. The results of the direct duplex-PCR on fecal specimens and cultures were the same.
Conclusion: The results indicate that the presented method in this study with sensitivity equal to the PCR is useful for isolation of Campylobacter spp. It seems that using the changed transport medium and optimization of bacterial culture conditions will be isolated these fastidiousbacteria better than basic transport media.
