شناسايي مولكولي ستلايت آران‌اي غير نكروزي ويروس موزاييك خيار Cucumber mosaic virus

Molecular Detection of Non-necrogenic Satellite RNA of Cucumber Mosaic Virus

ستلايت آران‌اي در برخي جدايه هاي ويروس موزاييك خيارCucumber mosaic virus, (CMV) سبب كاهش يا تشديد علائم اين ويروس مي‌شود. جهت بررسي وجود ستلايت آران-اي‌، نمونه‌هاي آلوده گياهي مشكوك به CMV از ميزبان‌هاي مختلف جمع‌آوري شدند. ابتدا با استفاده از روشهاي سرولوژيك مانند DAS-ELISA و ديبا CMV رديابي شد. به منظور بررسي بيشتر علائم و اثر احتمالي ستلايت آران‌اي بر روي علائم، آزمون تك لكه گيري با استفاده از گياهان ميزبان لكه موضعي انجام شد و سپس تك لكه‌ها جداگانه بر روي ميزبان تكثيري مايه‌زني شدند. گروه‌بندي علائم حاكي از ايجاد كلروز برخي از جدايه‌ها روي توتون بود كه از اثرات بارز ستلايت آر‌ان‌اي روي علائم مي‌باشد. با استفاده از يك جفت آغازگر اختصاصي منطبق بر منطقه رمز كننده پروتئين پوششي، CMV رديابي شد كه قطعه‌اي به طول 675 جفت باز تكثير شد. رديابي ستلايت آران‌اي با استفاده از يك جفت آغازگر اختصاصي CMV Sat-F و CMV Sat-R انجام شد كه در واكنش زنجيره‌اي پلي مراز (PCR) قطعه‌ي مورد نظر به طول حدود 360 جفت باز در يكي از جدايه ها تكثير يافت. مايه زني هاي متعدد روي توتون و گوجه‌فرنگي نشان داد كه وجود ستلايت آر‌ان‌اي موجب كاهش علايم CMV روي ميزبان مي شود كه از خصوصيات بارز اثر non-necrogenic Satellite RNA بر روي علائم مي‌باشد. اين اولين گزارش ستلايت آر‌ان‌اي CMV از ايران مي‌باشد.

Association of satellite RNA with Cucumber Mosaic Virus (CMV) leads to either attenuation or enhancement of the viral symptoms. For detection of the satellite RNAs in Iranian isolates of CMV, plant samples showing viral symptoms were collected from different farms in the provinces of East- and West- Azerbayjan and Ardebil. These samples were inoculated onto the experimental host plants in greenhouse with the virus being detected using common serological methods. To study the possible effects of the satellite RNA on symptoms of CMV, biological purifications were performed using local lesion and propagation hosts. One pair of primers, specific to the coat protein coding region of the virus was employed to detect CMV. Based on the behavior of CMV isolates on the test plants, especially on N.tabacum cv. Samsun on which the satellite RNA causes chlorosis, N.rustica, and also on tomato, seven isolates were found and designated as a group of the virus variants that cause chlorosis on N.tabacum cv. Samsun. For detection of the satellite RNA, a PCR product of about 360bp was amplified using a pair of specific primers(CMV-Sat –F and Sat-R) from one of the isolates. Several inoculations on tobacco and on tomato plants showed the possible presence of the satellite RNA attenuated CMV symptoms on the host plant, the characteristic of non-necrogenic Satellite RNAs. This is the first report from Iran on the possible presence of satellite RNA in CMV isolates