فعاليت‌ آنزيم‌هاي كربوهيدرازي مينوز برگ گوجه‌فرنگي (Tuta absoluta (Lep.: Gelechidae در حضور برخي عصاره هاي پروتئيني گياهي

Carbohydrases activity of tomato leaf miner, Tuta absoluta (Lep.: Gelechidae) in the presence of some plant proteinaceous extracts

مينوز برگ گوجه­ فرنگي، Tutaabsoluta از مهم‌ترين آفت سبزي و صيفي­ جات است كه به‌طور چشمگيري توليد گوجه ­فرنگي را در جهان تحت تأثير قرار داده است. با توجه به اثر نامطلوب كاربرد آفت‌كش‌هاي شيميايي در كنترل اين آفت نياز به روش‌هاي جايگزين است. يكي از روش‌هايي كه مي‌تواند در كنترل اين آفت مؤثر باشد استفاده از مهاركننده‌ هاي آنزيمي است. استفاده از مهاركننده‌ هاي آنزيمي نيازمند شناخت دقيق آنزيم‌ هاي هدف در حشرات آفت است. در پژوهش حاضر ميزان فعاليت، دما و اسيديتۀ بهينۀ آنزيم‌هاي آلفا-گلوكوزيداز، بتا-گلوكوزيداز، آلفا-گالاكتوزيداز و بتا-گالاكتوزيداز و نيز اثر مهاركنندگي عصارۀ پروتئيني گندم كوير، نخود، پيچك، داتوره و تاج‌خروس روي فعاليت اين آنزيم‌ها، همره با محاسبۀ IC50، بررسي شده است. بيشترين ميزان فعاليت مربوط به آلفا-گلوكوزيداز بود و ميزان اسيديتۀ بهينه براي فعاليت اين آنزيم‌ها به‌جز بتا-گلوكوزيداز برابر با 6 به دست آمد. آنزيم بتا-گلوكوزيداز علاوه بر فعاليت بالا در اسيديتۀ 6، در اسيديتۀ برابر 8 بيشترين ميزان فعاليت را داشت. دماي بهينه براي فعاليت آنزيم ­هاي آلفا و بتا-گلوكوزيداز 40 درجۀ سلسيوس و براي آلفا و بتا-گالاكتوزيداز به ترتيب 40 و 45 درجۀ سلسيوس به دست آمد. در بررسي زايموگرام ژل به ترتيب 2، 3، 1 و 1 باند آنزيمي به ترتيب براي آلفا و بتا-گلوكوزيداز و آلفا و بتا-گالاكتوزيداز مشاهده شد. بررسي تأثير مهاركننده‌هاي استخراج‌شده نشان داد، فعاليت آنزيم‌هاي آلفا-گلوكوزيداز و بتا-گالاكتوزيداز بيشتر تحت تأثير مهاركننده‌ها قرار مي‌گيرد. عصارۀ پروتئيني نخود در مقايسه با ساير گياهان، مهاركنندگي بيشتري را بر فعاليت آنزيم‌هاي كربوهيدرازي داشت.

The tomato leaf miner, Tuta absoluta Meyrick (Lepidoptera: Gelechiidae) significantly affects the production of tomato in the world. The damage is done through the holes created in the leaves mesophile due to the larval feeding. Due to unfavorable effects of insecticides application, search for alternative control measures such as suppression of digestive enzymes using enzyme inhibitors is required. In the present study, we investigated activity, optimum pH and temperature of α-glucosidase, β-Glucosidase, α-galactosidase and β-galactosidase. Also the inhibitory effect of proteinaceous extracts of wheat, datura, chickpea, ivy and amaranthus, beside IC50 calculation, were investigated. Based on the results, α-glucosidase had the highest activity followed by β-galactosidase, α-galactosidase and β-glucosidase respectively. The optimum pH of these enzymes activity except of β-glucosidase, was 6. β-glucosidase had high activity in pH 6 with optimal pH 8. The optimal temperatures for α and β-glucosidase enzymes and α and β-galactosidase were 40, 40, 40 and 45°C, respectively. Zymogram of gel electrophoresis revealed 2, 3, 1 and 1 isoforms respectively for α and β-glucosidase and α and β-galactosidase in the digestive system. Results showed that inhibitors more affected activity of α-glucosidase and β-galactosidase. Thus the highest inhibitory rate was related to the pea proteinaceous extract.