بيوكنترل نماتد Meloidogyn javanica مولد غده ريشه زيتون در شرايط گلخانه با استفاده از سودوموناس‌هاي فلورسنت

Biocontrol of Meloidogyn javanica Inducing Olive Root-Knot under Green-house Conditions and by use of Fluorescent Pseudomonads

از باغات زيتون ‌استان‌هاي گلستان، گيلان، زنجان و قم نمونه‌هاي خاك اطراف ريشه گردآوري شد. از نمونه‌هاي خاك، استرين‌‌هاي Pseudomonas روي محيط كشت King’s B جداشد. ويژگي‌هاي مهم فنوتيپي استرين‌هاي باكتري با روش‌هاي استاندارد باكتري‌شناسي بررسي شد. توليداكسيداز، رنگ فلورسنت، رشد در چهار درجه سلسيوس و آرژنين-ديهيدرولاز، در همه استرين‌ها مثبت بود. استرين‌هاي مورد بررسي توانايي ايجاد واكنش فوق حساسيت در توتون، ‌توليد لوان روي محيط آگار غذايي داراي 5% سوكروز و فعاليت پكتوليتيكي روي حلقه هاي سيب‌زميني را نداشتند. بيشتر استرين‌ها توانستند ژلاتين را ذوب نموده و نيترات رااحياء كنند. بامقايسه ويژگي‌هاي فنوتيپي بيشتراسترين‌هاي بررسي شده P. fluorescens و تعدادي نيز P. putida تشخيص داده شدند. توانايي نماتدكشي مايع فيلتر شده استرين‌ها روي لاروهاي تازه تفريخ شده نماتد Meloidogyn javanica در شرايط آزمايشگاه ارزيابي شد. آناليز داده‌ها نشان داد كه استرين‌ها تفاوت معني‌دار دارند و موجب مرگ و مير لاروهاي سن دوم از 13/33 تا 100 درصد شدند. اثر تعدادي از استرين‌ها به همراه نماتدكش فناميفوس ((Fenamiphos بر تعداد لارو، نماتد بالغ و تخم در ريشه نهال‌هاي زيتون در شرايط گلخانه بررسي شد. تعداد لارو و نماتد بالغ توليد شده در ريشه نهال‌هاي زيتون در تيمارهاي به كار برده شده تفاوت معني دار داشت. بيشترين تعداد لارو و نماتد بالغ در ريشه گياهان كنترل و كمترين در ريشه گياهان تيمار شده با نماتدكش فناميفوس و پس از آن استرين‌هاي CHAO و 208 توليد شد. تعداد كل تخم تشكيل شده در تيمارهاي بررسي شده تفاوت معني‌دار داشت. بيشترين تعداد تخم نماتد در ريشه گياهان كنترل و كمترين در ريشه گياهان تيمار شده با استرين CHAO و پس از آن استرين 99 تشكيل شد. تعدادي از استرين-ها روي تشكيل تخم نماتد موثرتر از فناميفوسس بودند. اين نخستين گزارش از كنترل بيولوژيك نماتد گره‌زاي ريشه زيتون به وسيله باكتري‌هاي آنتاگونيست سودوموناس فلورسنس است.

Rhizosphere soil samples were collected from olive orchards of Golestan, Guilan, Zanjan and Qom provinces. Fluorescent pseudomonad strains were isolated from the collected samples on King’s B medium and their phenotypic features characterized as based on the standard bacteriological methods. For all the tested strains oxidase reaction, fluorescent pigment, growth at 4?C and arginine dihydrolase were positive while tobacco hypersensitivity reaction, levan production on 5% sucrose and pectolytic activity on potato slices were proved negative. Most of the tested strains reduced nitrate while liquidizing gelatin. Based upon the phenotypic features of the tested strains most were identified as P. fluorescns while a few identified as P. Putida. Nematicidal activity of the cultural filtrate of the Psudomonas strains was tested on fresh hatched juvenile of Meloidogyne javanica under laboratory conditions. They caused nematode mortality ranging from 13.33 to 100% while showing significant differences. Efficacy of the representative strains along with fenamiphos on nematode egg productions, juvenile and mature nematode activity on olive root were studied under green-house conditions. Significant differences were observed among the applied treatments. The highest and lowest nematode juvenile and mature formation on olive seedling roots were observed for control plants and plants treated with fenamiphos respectively. The most effective strains on the different nematode life stages were P. fluorescens strains CHAO as well as strain 208. The highest and lowest nematode egg production on olive seedling roots were observed for control plants and plants treated with strains CHAO vs. strain 99 respectively. Some strains proved to be more effective than fenamiphos in nematode egg production on olive seedlings roots. This is the first report of the biocontrol of olive root knot nematode using flourescent pseudomonads.