ارزيابي خواص ضد ميكروبي لاكتوباسيلوس برويس جدا شده از خميرترش آرد كامل جو

Evaluating the antimicrobial properties of Lactobacillus brevis isolated from whole barley sourdough

در اين پژوهش، پس از شناسايي مولكولي آغازگر غالب لاكتوباسيلوس موجود در خميرترش آرد كامل جو، خصوصيات ضد ميكروبي جدايه مذكور و پاليده­ هاي خام و خنثي شده حاصل از فازهاي رشد لگاريتمي و سكون آن در برابر برخي از شاخص­ه اي باكتريايي و قارچي غذازاد مورد بررسي قرار گرفت. آناليز آماري نتايج اين پژوهش نيز با استفاده از طرح پايه كاملاً تصادفي به روش فاكتوريل صورت پذيرفت. بر اساس نتايج توالي­يابي محصولات PCR، لاكتوباسيلوس برويس به عنوان جدايه لاكتيكي غالب خميرترش آرد جو شناسايي شد. براي ارزيابي خواص ضد باكتريايي اين جدايه از روش­هاي انتشار در ديسك و ميكرو­دايلوشن و همچنين به منظور مطالعه خاصيت ضد قارچي آن از روش­هاي كشت دو ­لايه و لكه ­گذاري سوسپانسيون اسپور قارچ استفاده گرديد. بر اساس نتايج آزمون ديسك، بيشترين تاثير ضد ميكروبي لاكتوباسيلوس برويس در برابر باسيلوس سوبتيليس و كمترين مقدار آن در برابر اشرشيا كلي مشاهده شد. همچنين بيشترين درصد كاهش جمعيت شاخص­ه اي باكتريايي مورد مطالعه در روش ريز رقت، مربوط به باسيلوس سوبتيليس با 55/79 درصد در معرض پاليده خام فاز لگاريتمي لاكتوباسيلوس برويس بود. علاوه بر اين، خاصيت ضد قارچي لاكتوباسيلوس برويس بر عليه آسپرژيلوس فلاووس و آسپرژيلوس نايجر در روش كشت دو لايه مورد تاييد قرار گرفت كه اين قابليت در برابر دو شاخص مذكور، اختلاف معني­ داري (05/0α<) نداشت. پاليده خام حاصل از فاز لگاريتمي اين جدايه لاكتيكي نيز نسبت به ساير پاليده­ ها به شكل معني­داري (05/0α<) از تاثير بازدارندگي بيشتري بر روي آسپرژيلوس فلاووس و آسپرژيلوس نايجر در روش لكه ­گذاري سوسپانسيون اسپور قارچ برخوردار بود.

In this study after molecular identification of dominant Lactobacillus isolated from whole barley sourdough, antimicrobial properties of the isolate and it’s cell free culture filtrate (CCF) as native (natural pH) and neutralized obtained from logarithmic and stationary phases against some of food borne bacteria and fungi were investigated. For statistical analysis a completely randomized design with factorial arrangement was used. By sequencing of specific PCR products, mentioned isolate was identified as Lactobacillus brevis. For evaluation of antibacterial properties of the isolate, disc diffusion and microdilution and also for antifungal study, overlay and agar spore spot methods were used. Based on the results of disc diffusion, the highest and lowest antagonistic effects of L. brevis were observed against Bacillus subtilis and Escherichia coli, respectively. According to microdilution results, the highest effect of CCF on indicator bacteria was also observed in native CCF obtained from L. brevis logarithmic phase which reduced 79.55% of B. subtilis population. Furthermore, antifungal activity of L. brevis against Aspergillus flavus and Aspergillus niger was confirmed based on results of overlay method. The antifungal activity of the isolate was not different significantly (α<0.05). Native CCF obtained from L. brevis logarithmic phase in comparison to other CCF, was significantly (α<0.05) effective on mentioned fungi in agar spore spot assay.