شناسايي ژن هاي بتالاكتاماز در اشرشياكلي جداشده از زخم پاي ديابتي به روش Multiplex PCR

Identification of β-lactamase genes in Escherichia coli isolated from diabetic foot ulcer by Multiplex PCR

مقدمه: زخم پاي ديابتي، از عوارض ديابت شيرين است و با همراه شدن عفونت در زخم مي تواند خطر قطع عضو و يا حتي مرگ را افزايش دهد. باكتري E.coli ميتواند به وخامت وضعيت زخم منجر شود. مطالعه حاضر با هدف شناسايي ژنهاي بتالاكتاماز در اشرشياكلي جداشده از زخم پاي ديابتي مي باشد. روش كار: در اين مطالعه آزمايشگاهي، 110 جدايه اشرشياكلي از بيماران زخم پاي ديابتي بستري در بخش عفوني بيمارستانهاي پيمانيه جهرم، علي اصغر و نمازي شيراز در سال 1396 جداسازي شد. تعيين حساسيت آنتي بيوتيكي، شناسايي فنوتيپي سويه هاي توليدكننده بتالاكتامازهاي وسيع الطيف،(ESBL) سويه هاي توليد كننده متالوبتالاكتاماز (MBL) و سويه هاي توليد كننده كارباپنماز انجام شد. وجود ژن هاي كدكننده آنزيمهاي بتالاكتاماز bla SHV ،bla TEM و bla OXA-1 با آزمايش Multiplex PCR بررسي گرديد. يافته ها: در اين مطالعه 35 جدايه اشرشياكلي جداسازي شد. 13 جدايه توليد كننده بتالاكتامازهاي وسيع الطيف بودند. تعيين حساسيت آنتي بيوتيكي اشرشيا كلي جدا شده با استفاده از روش ديسك ديفيوژن صورت گرفت. شناسايي سويه هاي توليد كننده آنزيم هاي ESBL به كمك روش Double disk synergy test انجام گرفت. به منظور شناسايي ارگانيسم هاي مقاوم به كارباپنم در محيط TSB غلظت 0.5 مك فارلند استفاده شد. براي جداسازي و شناسايي سويه هاي توليد كننده MBL از نوارهاي (AB BioDisk, Solna, Sweden) Etest MBL بر طبق دستورالعمل شركت سازنده استفاده شد. در آزمايش multiplex PCR با استفاده از پرايمرهاي اختصاصي وجود ژن هاي كدكننده آنزيم هاي بتالاكتاماز شامل blaTEM، blaSHV و blaOXA-1 مورد مطالعه قرار گرفت. نتيجه گيري: با توجه به نتايج مطالعه حاضر و پايش مقاومت آنتي بيوتيكي در بيماران مبتلا به زخم پاي ديابتي ميتوان درمان عفونت هاي ناشي از اين عامل را تسهيل كرد.

Introduction: Diabetic foot ulcer is a complication of diabetes mellitus and can be associated with an increased risk of amputation or even death as a result of a wound infection. E.coli can lead to worsening of the condition of the wound. The aim of this study was to identify β-lactamase genes in E. coli isolated from diabetic foot ulcers Materials and Methods: In this experimental study, 110 isolates of E. coli from patients with diabetic foot ulcers hospitalized in the infectious ward of the in Peymanieh, Jahrom and Ali Asghar and Namazi, Shiraz, hospitals in 1396 were selected. Determination of antibiotic susceptibility, phenotypic identification of strains producing broad-spectrum beta-lactamases (ESBLs), strains producing MBL and strains producing Carbapenemas was done. The existence of genes encoding bla TEM, bla SHV and bla OXA-1 enzymes was investigated by multiplex PCR assay Results: In this study, 35 isolates of Escherichia coli were isolated. 13 isolates produced broad-spectrum betalactamases. Genetically, 19 isolates with TEM gene (54.2%) and 3 isolates with SHV (8.5%), which simultaneously had 1 isolate from 3 isolates with SHV, also had OXA-1 gene (2.8%). The highest susceptibility of Escherichia coli was to maropenem (99%) and the lowest antibiotic susceptibility to amikacin (3.2%). Conclusion: According to the results of this study and monitoring of antibiotic resistance in patients with diabetic foot ulcers, treatment of infections caused by this agent can be facilitated