بررسي چند شكلي اينترون يك ژن گيرنده پرولاكتين در نژاد شال و آميخته هاي شال و رومانوف با استفاده از روش PCR-SSCP

Investigating of Polymorphism in Intron 1 of Prolactin Receptor Gene in Shal Breed and Shal×Romanov Crossbreed using PCR-SSCP Technique

پرولاكتين از هيپوفيز قدامي ترشح مي شود و نقش هاي مهمي از جمله در توسعه پستان، تمايز و شيرواري دارد. هدف از اين مطالعه ارزيابي چند شكلي ژن گيرنده پرولاكتين در نژاد شال و آميخته هاي شال و رومانوف بود. براي اين منظور پس از خونگيري از دام ها و استخراج DNA به روش فنول كلروفرم، دو قطعه 176 و 215 جفت بازي از اينترون 1 ژن گيرنده پرولاكتين توسط آغازگرهاي اختصاصي و طي واكنش PCR تكثير شدند. سپس محصولات PCR با استفاده از الكتروفورز ژل آكريل آميد و رنگ آميزي نقره مورد آناليز قرار گرفتند. نتايج نشان داد در قطعه 176 جفت بازي از ژن گيرنده پرولاكتين (1PRLR) در نژاد شال دو ژنوتيپ AB و AC مشاهده شد. فراواني اين ژنوتيپ ها به ترتيب 0/92 و 0/80 و فراواني آلل هاي A، B و C به ترتيب0/50 ،0/46 و /040 بود. همچنين در جايگاه 1PRLR از اين ژن در نژاد آميخته شال و رومانف فراواني ژنوتيپ AB و AC به ترتيب 94/0 و 06/0 مشاهده شد و فراواني آلل هاي A، B و C نيز به ترتيب 0/50، 0/47 و 0/03 بود. بررسي چند شكلي در قطعه 215 جفت بازي از ژن گيرنده پرولاكتين (2PRLR) در نژاد شال و آميخته شال و رومانف، تنها ژنوتيپ AA را نشان داد. نتايج اين مطالعه نشان داد كه جايگاه 1PRLR در نژاد شال و آميخته شال و رومانف چند شكل در حالي كه جايگاه 2PRLR در نمونه هاي مورد مطالعه يك شكل بود.

Prolactin is secreted from the anterior pituitary gland and plays an important role in the mammary gland development, differentiation and lactation. The aim of current study was to evaluate prolactin receptor gene polymorphisms in the Shal breed and Shal×Romanov crossbreeds. For this purpose, after blood sampling of animals and extraction of DNA using phenol chloroform method, two fragments of 176 and 215 base pairs from intron 1 of prolactin receptor gene were amplified using PCR reaction. Then PCR products were analysed by acrylamide gel electrophoresis and silver staining. Results showed that AB and AC genotypes were identified in 176 base pairs fragment of prolactin receptor gene (PRLP1) in Shal breed. The frequencies of these genotypes were 0.92 and 0.08, respectively; and the frequencies of A, B and C alleles were 0.5, 0.46 and 0.04, respectively. Also, in the position of PRLR1 of this gene in Shal×Romanov crossbreeds, the frequencies of AB and AC genotypes were 0.94 and 0.06, respectively; and the frequencies of A, B and C alleles were 0.50, 0.46 and 0.04, respectively. A polymorphism study in the 215 bp fragment of the prolactin receptor gene (PRLR2) in the Shal and Shal×Romanov crossbreeds showed only AA genotype. Results of this study showed that PRLP1 position in Shal breed and Shal×Romanov crossbreeds was polymorphic, however the PRLP2 position in the studied samples was monomorphic