بررسي سيست و سلول هاي شكوفا شده گونه Chattonella subsalsa در منطقه ليپار (درياي مكران) بر اساس ريخت شناسي و توالي ژني ناحيه LSU-rDNA

Assessment of Chattonella subsalsa Cyst and Excysted Cells Isolateted from Sediment of Lipar Zone (Makran Coast) Based on Morphology and LSU-rDNAGen Sequence

اين تحقيق به منظور شناسايي سيست هاي فيتوپلانكتون موجود در منطقه ليپار (سواحل جنوب شرق ايران) براساس ريخت شناسي و فيلوژني سلول هاي شكوفا شده از سيست انجام گرديد. بدين منظور، در اين منطقه نمونه رسوب از سه ايستگاه در سال 1395 به وسيله نمونه بردار گرب اكمن با سطح جمع كنندگي 225 سانتي متر مربع جمع آوري گرديد. سيست هاي ناشناخته با ريخت شناسي متفاوت، در پتري ديش حاوي محيط كشت F2 كشت داده شدند و در آزمايشگاه تحت شرايط 12:12 ساعت روشنايي: تاريكي در درجه حرارت 1 °C± 25 نگهداري شدند. با بررسي اوليه ريخت شناسي گونه شكوفاشده، مشخص گرديد كه بيشترين شباهت را به گونه Chattonella subsalsa دارد. جهت تاييد شناسايي DNA از ايزوله خالص حاصل از كشت سيست استخراج شد و واكنش زنجيره اي پليمراز (PCR) جهت تعيين توالي ناحيه LSU-rDNA انجام گرديد. آناليزهاي فيلوژني نشان داد كه سلول شكوفاشده با 98% حمايت شبيه به گونه C. subsalsa است. بررسي رابطه سيست و فيتوپلانكتون و چرخه زندگي سلول مي تواند به عنوان ابزاري مهم در شناسايي گونه هاي فيتوپلانكتون در نظر گرفته شود.

This study has been carried out in order to identify the phytoplankton cysts from sediment of Lipar zone (southeast coast of Iran) based on morphology and phylogeny of germinated cell. The sediment samples were collected from three sations by Ekman grab with 225 cm2 collecting area in 2015. Unknown cysts with different morphology were cultured in the petridishei containing the F2 medium and kept in phycolab and Germinator undere a proper condition 12:12 L/D in 25 ºC±1. The germinated cell was similar to the Chattonella subsalsa based on intitial morphological assessment. To confirm the identification, DNA of germinated cell was extracted and PCR and gene sequence of partial LSU-rDNA region were done. Phylogenetic analysis showed that germinated cell with 98% boot strap support was resembeled to the C. subsalsa. The assessment of cyst/theca relationship in the phytoplankton lifecycle can be a useful tool in the identification of the phytoplankton cells.