مهار تكثير سلول‌هاي Calu-6 سرطان ريه با استفاده از shRNA ژن Cdc42

هدف: در پژوهش حاضر بيان ژن Cdc42 در سلول‌هاي Calu-6 مربوط به كارسينوماي ريه با استفاده از سيستم مهاري shRNA كاهش يافته و اثرات اين كاهش بر رشد و تكثير سلولي بررسي شد.مواد و روش‌ها: به‫منظور كاهش بيان ژن Cdc42 از مكانيسم مهاري shRNA استفاده شد. سيستم‌ لنتي‌ويروسي براي رسانش shRNA اختصاصي ژن Cdc42 به سلول‌هاي Calu-6 انتخاب شد. لنتي‌ويروس‌هاي نوتركيب به‫كمك ليپوفكتامين و از طريق ترانسفكشن هم‫زمان سه پلاسميد pMD2G، psPAX2 و p-GFP-C-shLenti به‫درون سلول‌هاي 293T توليد شد. سلول‌هاي Calu-6 تحت تيمار با لنتي‌ويروس نوتركيب قرار گرفتند. صحت ترانسداكشن با ميكروسكوپ فلورسنس مورد بررسي قرار گرفت. بررسي ماندگاري زيستي سلول‌هاي Calu-6، با انجام سنجش MTT انجام شد.نتايج: بررسي‌هاي ميكروسكوپ فلورسنس در 48 ساعت پس از ترانسفكشن نشان داد حدود 80 درصد سلول‌هاي 293T ترانسفكت شدند.نتايج ميكروسكوپ فلورسنس پس از تيمار سلول‌هاي Calu-6 با ويروس نشان دهنده صحت ترانسداكشن اين سلول‌ها است سنجش MTT نيز نشان داد كه سرعت رشد سلول‌هاي ترانسداكت شده با لنتي‌ويروس حاوي Cdc42-shRNA در مقايسه با سلول‌هاي كنترل، 58 درصد و نسبت به سلول‎هاي كنترل منفي 40 درصد كاهش يافت.نتيجه‌گيري: لنتي‌ويروس‌هاي نوتركيب، وكتورهاي مناسبي جهت انتقال shRNA-Cdc42 به سلول‌هاي Calu-6 بوده و اين انتقال منجر به كاهش تكثير سلول‌هاي Calu-6 شد. كاهش ميزان تكثير سلول‌هاي سرطان ريه به‫واسطه سيستم مهاري لنتي‌ويروسي-shRNA يك اثر پايدار و طولاني مدت مي‌باشد كه مي‌تواند در ژن‌درماني اين سرطان مورد توجه قرار گيرد.