جداسازي، كشت و تعيين هويت سلول‌هاي بنيادي مشتق از بافت چربي با استفاده از روش اكسپلنت_آنزيمي

هدف: در اين مطالعه، تركيبي از روش آنزيمي و اكسپلنت را براي جداسازي و كشت سلول هاي بنيادي چربي مورد استفاده قرار گرفت. مواد و روش ها: بافت چربي ناحيه ي شكم از رَت هاي نر نژاد ويستار جدا شد. بافت ها به قطعات كوچك (mm2≈( تقسيم شدند، سپس آنزيم Trypsin –EDTA با غلظت 25/0 درصد به بافت ها افزوده شد و به‫دنبال آن به‫مدت 30 دقيقه در دماي 37 درجه سانتي گراد در انكوباتور شيكردار قرار داده شدند. سپس بافت تيمار شده با آنزيم سانتريفيوژ شده و قطعات شناور كشت داده شدند. آناليزهاي آماري  مربوط به تعداد سلول ها  با استفاده از نرم افزار GraphPad Prismv6 مـورد بررسـي قرار گرفت. نتايج: نتايج نشان داد كه جمعيت سلول هاي بنيادي چربي جداسازي شده توسط اين روش تركيبي، تحت تاثير تنش كمتري قرار خواهند گرفت و جمعيت سلولي همگن و مشابهي را از لحاظ ظاهري و ريخت شناسي نشان خواهند داد و نيز آناليز فلوسايتومتري ماركر هاي سطحي نشان داد كه اين سلول ها براي CD73، CD105، CD44 و CD90  مثبت و براي CD34، CD45 و CD11b  منفي بودند نتيجه گيري: در اين مطالعه نشان داده شد كه سلول هاي بنيادي مشتق از بافت چربي رت مي تواند با روش جديد اكسپلنت_آنزيمي جداسازي شوند كه اين روش، يك روش كشت سلولي با قابليت تكرارپذيري بالا و بسيار به صرفه از لحاظ اقتصادي براي كاربردهاي كلينيكي مي باشد.