مقايسه روش‌هاي بروموكروزول گرين، تيتراسيون معكوس، واگنر و ماير حساسيت روش‌هاي مختلف براي رديابي آلكالوئيد در اسپيرولينا پلاتنسيس

Comparison of the accuracy of bromocresol green, reverse titration, Wagner and Meyer methods for detecting alkaloids in Spirulina Platenis

ريزجلبك‌ها از منابع ارزشمند متابوليت‌هاي ثانويه با فعاليت‌هاي زيستي متنوع هستند. از بين تركيبات زيست فعال مختلف، آلكالوئيدها به دليل داشتن خواص دارويي منحصربه‌فرد توجه زيادي را به خود جلب كرده‌اند. روش‌هاي مختلفي جهت بررسي حضور آلكالوئيد در منابع طبيعي وجود دارد. هدف از اين مطالعه، مقايسه حساسيت روش‌هاي ماير و واگنر با روش بروموكروزول گرين جهت رديابي اوليه آلكالوئيدها در ريزجلبك‌ها بود. براي اين منظور، عصاره متانولي اسپيرولينا پلاتنسيس به‌عنوان مدل ريزجلبكي تهيه گرديد. با استفاده از دو روش استاندارد (ماير و واگنر) و روش رنگ سنجي بروموكروزول گرين، حضور آلكالوئيدها در اين ريزجلبك بررسي شد. سپس كروماتوگرافي لايه‌نازك براي تأييد حضور آلكالوئيدها اجرا شد. محتواي آلكالوئيد كل نيز با استفاده از روش تيتراسيون اسيد- باز اندازه‌گيري شد. نتيجه ي ارزيابي عصاره متانولي اسپيرولينا پلاتنسيس براي حضور آلكالوئيدها توسط معرف‌هاي استاندارد، منفي بود؛ اما روش بروموكروزول گرين و كروماتوگرافي لايه‌نازك حضور آلكالوئيد در ريزجلبك را نشان داد. ميزان آلكالوئيد كل به دست آمده از روش تيتراسيون اسيد- باز، 11/4 ميلي‌گرم به ازاي هر گرم وزن خشك ريز جلبك محاسبه شد كه در مقايسه با مقدار به دست آمده از روش بروموكروزول گرين در سطح 05/0 P< تفاوت معني داري وجود نداشت. درمجموع اين مطالعه نشان داد كه روش بروموكروزول گرين به دليل سادگي، عدم نياز به تجهيزات گران‌قيمت و به‌خصوص حساسيت بالا، روش بهتري براي تعيين حضور آلكالوئيدها در زيست‌توده ريز جلبك‌ها است.

Microalgae are valuable sources of secondary metabolites with diverse biological activity. Among the different bioactive compounds, alkaloids due to the unique medicinal properties have attracted much attention. There are different methods to determine the presence of alkaloids in natural resources. The aim of this study was to compare the sensitivity of Meyer and Wagner methods with the bromocresol green method in the early detection of alkaloids in the microalgae. For this purpose, in 2018, the methanol extract of Spirulina platensis was prepared. Using two standard methods (Mayer and Wagner) and bromocresol green colorimetric method, the presence of alkaloids in Spirulina was investigated. Next, thin layer chromatography (TLC) was performed to confirm the presence of the alkaloid. Total alkaloid content was also measured using the acid–base titration procedure. Evaluation result of methanol extract of Spirulina for the presence of alkaloids by the standard reagents was negative. But bromocresol green method and TLC showed the presence of alkaloids in this microalgae. The total alkaloid content was 11.4 mg/g dry weight. Overall, this study showed that bromocresol green method is a better detection method of alkaloids in the microalgae biomass because of the simplicity, lack of requirement of expensive equipments, particularly high sensitivity.