بيان موقت ژن pgip2 و ژن كايمريك sppgip2-aaa-pgip1 در Nicotiana benthamiana

ايجاد مقاومت در برابر بيماري ها با استفاده از ژن هاي مقاوم به عامل بيماريزا در گياهان يكي از راهكارهاي بهبود محصولات زراعي در كشاورزي مي باشد. پلي گالاكتوروناز ها با اشكال ايزو آنزيمي مختلف جزءاولين آنزيم هايي هستند كه قارچ هاي فيتوپاتوژنيك جهت كلونيزاسيون در ديواره سلول گياهي ترشح مي كنند. برخي گياهان نيز داراي پروتئين هاي PGIP (Polygalacturonase Inhibitor Proteins) متنوعي هستند كه عملكرد مهاركنندگي اختصاصي عليه آنزيم هاي پلي گالاكتوروناز قارچي دارند. در اين تحقيق سازه كايمريك حاوي ژنهاي pgip1 و pgip2 و سازه حاوي ژن pgip2 جهت بيان موقت و بررسي فعاليت مهاركنندگي پروتئين كايمر در مقايسه با PGIP2 به برگ هاي گياه توتون ترانسفورم گرديد. حضور و بيان ژن بترتيب با استفاده از روش PCR و وسترن بلات تائيد شد و در سنجش فعاليت آنزيمي به روش Caplet Assay پروتئين كايمري نسبت به پروتئين PGIP2 منفرد افزايش فعاليت نشان داد. در نتيجه پروتئين كايمريك طراحي شده از نظر بيولوژيكي فعال بوده و نسبت به PVPGIP2 منفرد قدرت مهاركنندگي بالاتري را نشان مي دهد. پيش بيني مي گردد با انتقال پروتئين كايمر به گياهان زراعي گياهان تراريخت مقاومتري بدست آيد.