بررسي اثر بيوسورفكتانت باسيلوس سوبتليس بر بيوفيلم هاي باكتري هاي استافيلوكوكوس

Investigation of the effect of biosurfactant of Bacillus subtilis against Staphylococcus strains biofilms

سابقه و هدف بيوسورفكتانت ها، تركيباتي هستند كه به وسيله ميكروارگانيسم هاي مختلف توليد مي شوند و داراي خاصيت امولوسيفايري هستند. هدف از اين تحقيق، بررسي اثر بيوسورفكتانت استخراجي از باسيلوس سوبتليس (PTCC1720) در برابر تشكيل بيوفيلم استافيلوكوكوس اورئوس (PTCC 1112)، استافيلوكوكوس ساپروفيتيكوس (PTCC 1440) و استافيلوكوكوس اپيدرميديس (PTCC 1435) بود. مواد و روش ها اين مطالعه به صورت آزمايشگاهي انجام و در آن اثر بيوسورفكتانت توليدي توسط باسيلوس سوبتليس در جلوگيري از تشكيل بيوفيلم و نيز خارج كردن بيوفيلم توليدي توسط گونه هاي مختلف استافيلوكوكي بررسي شد. پس از كشت باسيلوس سوبتليس و استخراج بيوسورفكتانت توليدي، بررسي اثر ضد بيوفيلمي بيوسورفكتانت با استفاده از دستگاه الايزا ريدر در طول موج 570 نانومتر صورت گرفت. محاسبات آماري توسط نرم افزار SPSS ويرايش 16 و با تست ANOVA صورت گرفت. ميانگين تيمارها در سطح اطمينان 95 درصد توسط روش دانكن محاسبه شد. نتايج بر اساس نتايج، بيوسورفكتانت توليدشده توسط باسيلوس سوبتليس داراي انديس امولوسيفيكاسيون حدود 40 درصد و ميزان فعاليت بيوسورفكتانت جداسازي شده توسط تكنيك پخش روغن، معادل با 0/3±1/8 سانتي متر مربع بود. همچنين بيوسورفكتانت توليدي توسط باسيلوس سوبتليس بيشترين اثر را در جلوگيري از تشكيل بيوفيلم باكتري هاي استافيلوكوكوس اورئوس و استافيلوكوكوس ساپروفيتيكوس داشت. بيوفيلم استافيلوكوكوس اپيدرميديس نيز بيشترين مقاومت را نشان داد. نتيجه گيري مطابق اين تحقيق، اثر ضد بيوفيلمي بيوسورفكتانت استخراجي از باسيلوس سوبتليس بر روي بيوفيلم باكتري هاي استافيلوكوكوس اورئوس، اپيدرميديس و ساپروفيتيكوس مشخص شد. به علاوه، اين نوع بيوسورفكتانت مي تواند در خارج كردن بيوفيلم تشكيل شده توسط گونه هاي استافيلوكوكي، موثر باشد.

Background: Biosurfactants are compounds that are produced by different microorganisms and have an emulsifying property. This study aimed to investigate extractive biosurfactant from bacillus subtilis (PTCC1720) against the biofilms of Staphylococcus aureus (PTCC 1112), Staphylococcus saprophyticus (PTCC 1440) and Staphylococcus epidermidis (PTCC 1435). Materials and Methods: This study was conducted in vitro to examine the effect of biosurfactant produced by Bacillus subtilis in prevention of biofilm formation and removal of biofilms produced by different staphylococcal species. First, bacillus subtilis was cultured in suitable culture media for producing biosurfactant. Then, extraction of produced biosurfactant was done and anti-biofilm properties were assessed by determination of optical density at 570 nm by ELISA reader equipment. Statistical analysis was performed by SPSS software version 16 and ANOVA. The means were compared at 95% confidence level by Duncan's method. Results: According to the results, the biosurfactant produced by bacillus subtilis had emulsification index equal to 40% and oil replacement area was 1.8 ± 0.3 cm-2. Produced biosurfactant by bacillus subtilis had a significant effect on preventing microbial formation with the highest effect on biofilm of staphylococcus aureus and Staphylococcus saprophyticus. Also, the results showed that the biofilm of staphylococcus epidermidis had the highest resistance in this respect. Conclusion: According to this study, the antibiofilm activity of biosurfactant extracted from Bacillus subtilis against the biofilm of staphylococcus aureus, epidermidis and saprophyticus was shown. In addition, this type of biosurfactant can be effective in removing biofilms formed by staphylococcal strains.