بررسي تاثير آپوپتوتيك انتقال ژن آپوپتين به رده سلولي مالتيپل ميلوما

Apoptotic effect of apoptin gene transduction on multiple myeloma cell line

هدف: از زمان شناسايي مالتيپل ميلوما، دومين بدخيمي شايع هماتولوژيك، پيش‌رفت‌هاي شگرفي در جهت افزايش ميزان طول عمر بيماران صورت گرفته است. در دوره‌اي كه استفاده راه‌كارهاي درماني جديد رو به افزايش است، كلون كردن ژن‌هاي القاءكننده آپوپتوز در ژنوم سلول‌هاي بدخيم به طور چشمگيري مورد توجه قرار گرفته است. در اين مطالعه، اثر ضد سرطاني وكتور بيان‌كننده ژن آپوپتين را در رده سلولي مشتق شده از مالتيپل ميلوما (KMM-1) بررسي شد. مواد و روش‌ها: در اين مطالعه تجربي، به منظور انتقال ژن آپوپتين به رده سلولي KMM-1، وكتور لنتي ويروسي بيان‌كننده آپوپتوتين ساخته شد. سپس از با استفاده از تكنيك فلوسيتومتري و quantitative real-time PCR به ترتيب كارايي ترانس داكشن و بيان ژن آپوپتين مورد ارزيابي قرار گرفت. در ادامه، اثر ضدسرطاني بيان ژن آپوپتين در رده سلولي KMM-1 به روش MTT و تريپان بلو مورد بررسي قرار گرفت. يافته‌ها: نتايج فلوسايتومتري نشان داد كه وكتور بيان‌كننده آپوپتين به صورت موفقيت‌آميز و با كارايي ترانس داكشن بيش از 90% به درون سلول‌هاي KMM-1 انتقال يافته است. هم‌چنين دريافتيم كه بيان بيش از حد آپوپتوتين، كه با افزايش ميزان mRNA به حدود 8 برابر مشخص شد، مي‌تواند سبب القا اثر سايتوتوكسيك در سلول‌هاي مالتيپل ميلوما گردد. نتايج نشان داد كه بيان آپوپتوتين نه تنها زنده-ماني سلول‌ها را به طور قابل ملاحظه‌اي كاهش داد (001/0P<)، بلكه به طور به‌طور مشخص فعاليت متابوليك را نيز مهار كرد (001/0P<). نتيجه‌گيري: اين مطالعه نشان داد كه وكتور بيان‌كننده ژن آپوپتين داراي اثر ضد سرطاني در مالتيپل ميلوما بوده و مي‌تواند در آينده نزديك از نظر باليني قابل دسترس باشد.

Introduction: Following the first description of multiple myeloma (MM), as the second most prevalent hematologic malignancy, multiple promising advances have paved the way to increase the long-lasting complete remission for patients. In the era of the novel therapeutic approaches, the cloning of the apoptosis-inducing genes into the genome of malignant cells has attracted tremendous attention. In this study, we aimed to evaluate the anti-cancer effect of apoptin-expressing vector on multiple myeloma-derived KMM-1 cell line. Materials and Methods: In this experimental study, we constructed the lenti-viral vector expressing apoptin for transferring this gene into KMM-1 cells. Transduction efficiency and apoptin gene expression were further confirmed by flow cytometric and quantitative real-time PCR analysis, respectively. Afterwards, the anti-survival effect of overexpressed apoptin on KMM-1 cells was also evaluated by applying MTT, and trypan blue assays. Results: The results of flow cytometric analysis demonstrated that the apoptin-expressing vector was successfully transduced into KMM-1 cells, with the transduction efficiency of more than 90%. In addition, we found that the overexpression of apoptin, as revealed by 8-fold increase in its mRNA level, exerted a remarkable cytotoxic effect in MM cells. The resulting data declared that apoptin expression not only significantly reduced cell viability (P < 0,001) but also potently halted KMM-1 metabolic activity (P < 0.001). Conclusion: This study highlighted the promising anti-cancer effect of lenti-viral vector expressing apoptin in multiple myeloma that may be clinically accessible in the near future.