تاثير لوتئولين، شوري و ترشحات بذر بر بيان ژن گره‌زايي Rhizobium meliloti L. با استفاده از ارزيابي فعاليت آنزيم β-galactosidase

The effect of luteolin, seed exudate and salinity on the nod gene expression of R. meliloti using β-galactosidase activity assay

فلاونوئيدها نقش مهمي را به عنوان سيگنال‌هاي مولكولي در تشكيل گره­ها توسط ريزوبيوم­هاي همزيست بازي مي­كنند. لوتئولين يكي از مهمترين فلاونوئيدها است كه توسط بذرهاي در حال جوانه­زني يونجه ترشح مي­شود. همچنين به نظر مي­رسد سطح شوري بالا بدون حضور فلاونوئيد موجب افزايش بيان ژن­هاي گره­زايي مي­شود. بنابراين، در اين آزمايش تأثير لوتئولين، ترشحات بذر و شوري بر بيان ژن گره­زايي دو سويه حساس و مقاوم به شوري S. meliloti با استفاده از پلاسميد حامل پروموتور nodA و ژن lacZ از باكتري Escherichiacoli و از طريق فعاليت آنزيم β-galactosidase مورد بررسي قرار گرفت. نتايج نشان داد كه پيش تيمار باكتريها با لوتئولين و ترشحات بذر بيان ژن nodA را افزايش داد كه تأثير ترشحات بذر بر بيان ژن بيشتر از لوتئولين بود. همچنين نتايج نشان داد كه سطح شوري بالاmM 300 و 400 بدون حضور فلاونوئيد منجر به بيان ژن گره­زايي شد و در شرايطي كه شوري بالا و القاكننده­ ها به طور همزمان وجود داشت، بيان ژن nodA بيشتر بود. به نظر مي­رسد ريزوبيوم­ها از يك مكانيسم جايگزين براي بهبود گره­زايي در شرايط تنش استفاده مي­كنند.

Flavonoids play a crucial role as signal molecules in promoting the formation of nodules by symbiotic bacteria commonly known as rhizobia. Luteolin is one of the most important flavonoids, which release from seeds during the first 4 hours of imbibition. It also seems that high NaCl concentrations induce the nod genes the absence of flavonoid inducers. We studied the effect of luteolin, Seed exudate and salinity on the induction of nod genes in R. Meliloti carrying a plasmid with a translational fusion between R. Meliloti nodA and lacZ of Escherichia coli, and the expression activity was measured by β -galactosidase activity. The results showed that pretreatment of bacteria with luteolin and seed exudate increased the expression of the nodA gene, that the effect of seed exudate on gene expression was more than the effect of luteolin. The results also showed that high salinityو 300 and 400 mM led to the expression nod gene in the absence of flavonoids and when there is high NaCl and inducers simultaneously, the expression of nod gene was greater. It seems that, rhizobium use a possible mechanism to improve nodulation under stress conditions.Due to increasing salinity and synthetic fertilizers problem, it seems searching about salinity and symbiosis of rhizobium and legums is importan and necessary.