بررسي اثر متيل ترشيو بوتيل اتر (MTBE) بر DNA سلول‌هاي خوني ماهي كلمه درياي خزر (Rutilus caspicus) به روش كامت قليايي در شرايط آزمايشگاهي

The In Vitro Effect of Methyl Tert-Butyl Ether on DNA of Blood Cells (Rutilus caspicus) by Comet Assay

متيل ترشيو بوتيل اتر(MTBE) سبب افزايش ميزان اكسيژن سوخت مي‌شود و ميزان مونواكسيد كربن و آلودگي هوا را كاهش مي­دهد. MTBE در خاك بسيار متحرك است و حركت آن در آب تابع قوانين حركت آب در خاك است. MTBE مقاومت زيادي به تخريب زيستي دارد و نيمه عمر آن در آب بالاست. جذب آن توسط ذرات خاك ضعيف، داراي حلاليت بالايي در آب و بسيار متحرك است. اين تحقيق به منظور بررسي ميزان اثر اين آلاينده بر رويDNA سلول­هاي خوني ماهي كلمه درياي خزر كه در معرض غلظت­هاي 50، 100 و 150 ميلي­گرم بر ليتر MTBE به مدت 7، 14 و 21 روز قرار گرفته بودند انجام شد. ميانگين درجه حرارت آب 1 ± 19، اكسيژن آب 0/2 ± 7/6 ميلي­گرم در ليتر و شوري صفر در نظر گرفته شد. تعداد 220 عدد ماهي كلمه درياي خزر با متوسط طول بدن 30±150 ميلي­متر و وزن 3 ± 15 گرم از كارگاه تكثير سيجوال واقع در بندر تركمن در استان گلستان تهيه شد و توسط كيسه­هاي حاوي آب (1/3) و اكسيژن (2/3) به آزمايشگاه منتقل شد. بعد از دوره آداپتاسيون تعداد 13 عدد ماهي در آكواريوم­هاي 50 ليتري قرار داده شد كه مجموع آكواريوم­هاي شاهد 3 عدد و تعداد آكواريوم هاي تيمار 9 عدد بود. در هفته اول، دوم و سوم آزمايش، سه ماهي به صورت تصادفي از هر آكواريوم برداشت و خون ماهيان گرفته شد و پس از انجام مراحل تعيين شده خون ماهيان بر روي لام تثبيت و براي مشاهده با ميكروسكوپ فلورسانس لام­ها در يخچال نگه داري شدند. در اين مطالعه براي بررسي ميزان تخريب DNA از نرم­افزار Casp 1.2.3b1 استفاده شد. در اين نرم­افزار چند مورد از مشخصات كامت قليايي به صورت داده استخراج مي­شود. نتايج تحقيق حاضر نشان داد، كه اختلاف معني­داري بين شاهد و ساير تيمارها از لحاظ ميزان تخريب DNA وجود دارد. همچنين با افزايش زمان در معرض قرارگيري، ميزان آسيب DNA به طور معناداري افزايش يافته است (0/01 >p).

MTBE increases oxygen consumption as well as reducing carbon monoxide and air pollution. It is very dynamic in soil, and its movement in water is a function of water movement in soil. MTBE is resistant to biodegradation, its half-life in water is long, its absorption in soil particles is weak, having high solubility in water, and being very dynamic. This research was aimed at investigating DNA blood cells of Rutilus caspicus in concentrations of 50, 100 and 150 mg/L MTBE for 7, 14 and 21 days. The mean temperature of water was 19 ± 1°C, water oxygen was 7.6 ± 0.2 mg/l, and salinity was considered zero. 220 R. caspicus with an average body length of 150 ± 30 mm and a weight of 15 ± 3 grams were prepared from Sijawal multiplication workshop located at the Turkmen port in Golestan Province and transferred to the laboratory by means of bags containing water (1/3) and oxygen (2/3). After the adaptation period, 13 fish were placed in 50-liter aquariums. The total number of control aquariums was three, and the number of treatment aquariums was nine. In the first, second and third weeks of the test, three fish were randomly taken from each aquarium and their blood samples were collected. After performing the determined stages, the blood samples of the fish were fixed on the slide and kept in the refrigerator for observation with a fluorescence microscope. In this study, Casp 1.2.3b1 software was used to evaluate the DNA degradation. In this software, several examples of alkaline comet data are extracted in data form. The results of this study showed that there was a significant difference between the control and other treatments in terms of DNA degradation. Furthermore, with increasing exposure time, the amount of DNA damage significantly increased (p < 0.01).