اثرات امواج فراصدا بر فعاليت اوره‌آز محلول و تثبيت‌شده بر نانو ذرات مغناطيسي و سيليكا ژل

Ultrasound effects on the activity of free and immobilized urease on the magnetic nanoparticles and silica gel

در اين مطالعه، اثر امواج فراصدا با بسامد پايين بر ساختار و فعاليت آنزيم اوره‌آز بررسي شده است. براي اين منظور، آنزيم اوره‌آز در بازه‌هاي زماني متفاوت در معرض امواج فراصدا با بسامد ثابت 20 كيلوهرتز قرار گرفت. آنزيم اوره‌آز بر روي نانوذرات مغناطيسي اكسيد آهن (3O2Fe) و سيليكا ژل فعال‌شده به ترتيب با بازده اتصال 89 درصد و 66 درصد تثبيت شد. فعاليت آنزيم، پارامترهاي جنبشي (سينتيكي)، پي‌اِچ و دماي بهينه آنزيم محلول و هم‌چنين تثبيت‌شده در شرايط متفاوت تعيين شدند. تغيير ساختار آنزيم محلول، ناشي از امواج‌دهي براساس طيف‌هاي فلورسانس و فرابنفش تائيد شد. فعاليت آنزيم در حضور امواج فراصدا تشديد شد. اعمال امواج فراصدا حين فعاليت آنزيمي، باعث افزايش فعاليت آنزيم شد. در اثر اعمال امواج فراصدا بر آنزيم محلول و تثبيت‌شده بر سيليكا ژل قبل از واكنش آنزيمي، كاهش فعاليت آنزيم و Vmax و افزايش Km مشاهده شدند. اين در حالي است كه امواج‌ فراصدا روي آنزيم تثبيت‌شده بر نانوذرات اكسيد آهن (مغناطيسي) تأثيري نداشتند.

In this study, the effect of low-frequency ultrasound on the structure and activity of urease enzyme has been investigated. For this purpose, the enzyme was exposed to ultrasound with 20 kHz frequency at different time intervals. The urease enzyme was immobilized on the surface of magnetic nanoparticles (Fe2O3), and activated silica gel with 89% and 66% efficiency respectively. The enzyme activity, kinetic parameters, optimum pH and temperature were determined for free and immobilized enzymes at different conditions. The structure change of free enzymes caused by ultrasound was vreified by fluorescence and UV spectrum. The activity of enzyme was amplified in the presence of ultrasound. A reduction in the activity and Vmax and an increase in Km were observed for both free and immobilized enzymes on the activated silica gel after ultrasound treatment. While, ultrasound had no effect on the immobilized enzymes on the magnetic nanoparticles.