بررسي مقاومت فلوروكينولوني وابسته به فعاليت پمپ افلاكس Mex-oprM در سويه هاي مقاوم چندگانه دارويي سودوموناس ائروجينوزا با استفاده از ممانعت گر كربونيل سيانيد m-كلروفنيل هيدرازون (CCCP)

Investigation of efflux pump -activated fluoroquinolone resistance in Pseudomonas aeruginosa multiple

از مشكلات مهم عفونت هاي بيمارستاني مرتبط با سودوموناس ائروجينوزا مقاومت چند دارويي است. پمپ هاي تراوشي باكتري قادر هستند طيف وسيعي از آنتي بيوتيك ها و دترجنت ها را به خارج از سلول تراوش كنند. هدف از مطالعه حاضر بررسي فعاليت پمپ افلاكس در سويه هاي مقاوم چندگانه دارويي سودوموناس آئروجينوزا مقاوم به فلوروكينولون ها است. مطالعه بر روي50 ايزوله سودوموناس آئروجينوزا جدا شده از نمونه هاي باليني بيماران مراجعه كننده به بيمارستان ميلاد تهران انجام گرفت. پس از شناسايي جدايه ها با انجام آزمون هاي بيوشيمايي، حساسيت آنتي بيوتيكي با روش انتشار در ديسك و طبق استاندارد CLSI2017تعيين شد. پس از تعيين سويه هاي مقاوم چند دارو، كم ترين غلضت مهاركنندگي رشد آنتي بيوتيك هاي سيپروفلوكساسين و لووفلوكساسين تعيين شد و با استفاده از كربونيل سيانيد m-كلروفيل هيدرازون (CCCP) فعاليت پمپ افلاكس جدايه ها مورد بررسي قرار گرفت.34% سويه MDR سودوموناس آئروجينوزا كه به بيش از دو كلاس آنتي بيوتيكي مقاوم بودند، شناسايي شدند. با روش ممانعت گر CCCP براي سويه هاي MDR، 2سويه براي آنتي بيوتيك سيپروفلوكساسين و 3سويه براي آنتي بيوتيك لووفلوكساسين كاهش 4 برابري و يا بيش از 4برابر MIC پس از تاثير ممانعت گر CCCP داشته اند. فراواني سويه هاي MDRسودوموناس آئروجينوزا مورد مطالعه پايين است. تنها 4 ايزوله از بين سويه هاي MDR فعاليت پمپ افلاكس داشتند. بنابراين پمپ افلاكس مكانيسم اصلي براي مقاومت به سيپروفلوكساسين ولووفلوكساسين در بين اين ايزوله ها نيست و براي مطالعات بعدي بررسي ساير مكانيسم هاي مقاومت فلورو كينولوني توصيه مي شود.

One of the problems with Pseudomonas aeruginosa-related infections is prevalence of Multiple-Drug Resistant isolates. Bacterial efflux pumps are capable of a wide range of antibiotics and detergents to efflux out of the cell. The aim of study was determining efflux pumps activity in fluoroquinolones resistant MDR strains of Pseudomonas aeruginosa. 50 strains ofPseudomonas aeruginosa were isolated from clinical specimens of patients were admitted to Milad hospital and diagnosed by biochemical tests. Antibiotic susceptibility was determined by disc diffusion method according to CLSI. After determining the MDR isolates, for evaluation of efflux pump activity the MIC of ciprofloxacin, levofloxacin was determined before and after treatment by CCCP inhibitor. 17(34%) MDR strains of Pseudomonas aeruginosa that were resistant to more than two classes of antibiotics were detected. Among flouroqinolon MDR strains of Pseudomonas aeruginosa 2 (11.8%) and 3(17.64%) had MIC reduction of at least 4 times and more for ciprofloxacin and lovofloxacin after carbonyl cyanide-m-chlorophenyl hydrazone (CCCP) effect, respectively. The frequency of MDRPseudomonas aeruginosa are low. Only 4 isolates among MDR bacteria had efflux pump activity. So the efflux pump is not major mechanism for resistance to ciprofloxacin and lovofloxacin among these isolates and further studies about other resistance mechanism is recommended.