ارزيابي شيوع فنوتيپي و مولكولي پمپ هاي افلاكس در ايزوله هاي باليني استافيلوكوك اورئوس مقاوم به متي سيلين

Evaluation of the Phenotypic and Molecular Pattern of Efflux Pumps in Clinical Isolates of Methicillin-resistant

سابقه و هدف: پمپ هاي افلاكسي بعنوان يكي از مهمترين خطوط ايجاد مقاومت آنتي بيوتيكي در عصر جديد شناخته شده اند. استافيلوكوك اورئوس يكي از گروه هاي باكتريايي داراي پمپ هاي افلاكسي ميباشد. فعاليت اين پمپها توسط ژن هاي خاصي كد ميشود. هدف از اين مطالعه تعيين الگوي فوتيپي و مولكولار عامل پمپ هاي افلاكسي در ايزوله هاي باليني استافيلوكوك اورئوس مقاوم به متي سيلين مي باشد. مواد و روش‌‌ها: 302 باكتري استافيلوكوك اورئوس از نمونه هاي مختلف باليني جمع اوري شد. 145 ايزوله مقاوم به متي سيلين با استفاده از روش هاي ديسك ديفيوژن سفوكسيتين(30 ميكروگرم) و همچنين تعيين حداقل غلظت مهاري با استفاده نوارهاي E-test سفوكسيتين، تعيين شدند. جهت شناسايي ژن هاي عامل مقاومت به ژيراز ها و افلاكس پمپ ها از روش Multiplex PCR استفاده گرديد. داده هاي بدست آمده با استفاده از نرم افزار SPSS نسخه 16 تجزيه و تحليل شد. يافته‌ها: از 145 ايزوله استافيلوكوك اورئوس مقاوم به متي سيلين بيشترين فراواني مربوط به آنتي بيوتيك هاي نورفلوكساسين و سيپروفلوكساسين بود. همچنين، ژن norA در 39 ايزوله باليني(25/82 درصد) ، ژن norB در 12 ايزوله باليني(9/97 درصد) ، ژن norC در 41 ايزوله باليني(49/15 درصد) ، ژن grlA در 75 ايزوله باليني(49/669 درصد)، ژن grlB در 37 ايزوله باليني(26/50 درصد) ، ژن gyrA در 58 ايزوله باليني(38/41 درصد) و ژن gyrB در 19 ايزوله باليني(12/58 درصد) مثبت بودند. نتيجه‌گيري: حضور پمپ هاي افلاكسي در سويه هاي مقاوم به متي سيلين استافيلوكوك اورئوس، زمينه ظهور باكتري هاي داراي مقاومت چند گانه را فراهم كرده است.

Background and Objective: Efflux pumps are regarded as one of the most important mechanisms of antibiotic resistance in this era. Staphylococcus aureus is one of the bacterial groups with efflux pumps. The pumps’ activity is coded by specific genes. The aim of this study was to determine the phenotypic and molecular pattern of efflux pumps in the clinical isolates of methicillin-resistant S. aureus. Materials and Methods: This study was conducted on 302 S. aureus bacteria collected from different clinical specimens. We detected 145 isolates of methicillin-resistant using disk diffusion method with cefoxitin (30 µg) as well as minimum inhibitory concentration with E-test strips and cefoxitin disks. In addition, multiplex polymerase chain reaction method was employed to identify the genes responsible for resistance to efflux pump and gyrase. The data were analyzed using SPSS software version 16. Results: Among the 145 isolates of methicillin-resistant S. aureus, norfloxacin and ciprofloxacin had the highest frequency. Furthermore, norA, norB, norC, grlA, grlB, gyrA, and gyrB genes were positive in 39 (25.825%), 12 (9.97%), 41 (49.15%), 75 (49.66%), 37 (26.50%), 58 (38.41%), and 19 clinical isolates (12.58%), respectively. Conclusion: As the findings indicated, the presence of efflux pumps in the strains of methicillin-resistant Staphylococcus aureus provided the ground for the emergence of multi-drug resistant bacteria