افزايش سميت داروهاي شيمي درماني با رتينوئيك اسيد تمام ترانس بر روي سلول هاي CD44

Increased Toxicity of Chemotherapeutic Drugs by All-Trans Retinoic Acid in Cd44 Cells

سابقه و هدف: در مطالعات اخير علت مقاومت تومور مري به داروهاي شيمي درماني، وجود سلول­هاي CD44 تمايز نيافته بيان شده است. هدف از اين مطالعه بررسي اثرات تمايز­گري ″رتينوئيك اسيد تمام ترانس″ براي كاهش مقاومت تومور­ها به شيمي درماني و همچنين بهبود اثر سميّتي آنها مي باشد. مواد و روشها: دراين مطالعه تجربي سلول­هاي CD44+ و CD44-با روش MACS از رده سلوليKYSE-30 جدا گرديد. اثرات سميتي تيمار رتينوئيك اسيد با سيس پلاتين و رتينوئيك اسيد با 5-فلورواوراسيل به طور مجزا بر روي دو گروه سلولي CD44+ و CD44- بررسي و سميت سلولي با استفاده از روش­ تعيين فعاليت متابوليكي، رنگ آميزي آكريدين اورنج/ اتيديوم برومايد و فلوسايتومتري تعيين گرديد. يافته ­ها: شناساگر CD44 در 6/25 درصد از جمعيت رده سلولي KYSE-30 بيان شده بود. يافته هاي حاصل از روش فلوسايتومتري نشان داد كه تيمار تركيب رتينوئيك اسيد با داروها باعث افزايش توقف سيكل سلولي در سلول­هاي CD44+ شد (p<0/05) اما در سلول­هاي CD44- چنين اثري را نشان نداد . روش تعين فعاليت متابوليكي افزايش مرگ مير سلولي به همراه كاهش IC50 و رنگ آميزي آكريدين اورنج/ اتيديوم برومايد افزايش درصد سلول هاي آپوپتوز اوليه و ثانويه در سلول هاي CD44+ نشان داد اما در سلولهاي CD44- اين اثرات فقط در تركيب رتينوئيك اسيد با سيس پلاتين مشاهده شد. (p<0/05) نتيجه گيري: نتايج اين تحقيق نشان داد كه رتينوئيك اسيد تمام ترانس، باعث افزايش سميت داروهاي سيس پلاتين و 5- فلورواوراسيل بر روي سلول­هاي CD44+ گرديد.

BACKGROUND and OBJECTIVE: In recent studies, undifferentiated CD44 cells have been introduced as the major cause of chemotherapeutic drug resistance in esophageal cancer. In this study, we aimed to evaluate the effects of all-trans retinoic acid on reducing chemotherapeutic drug resistance and improving the associated toxic effects. METHODS: In this clinical study, CD44+ and CD44- cells were separated from KYSE-30 cell line, using magnetic-activated cell sorting (MACS) method. The cytotoxic effects of retinoic acid treatment, combined with cisplatin and 5-fluorouracil, were separately evaluated in two cell groups, i.e., CD44+ and CD44-. Cytotoxicity was determined by identifying cellular metabolic activity, acridine orange/ethidium bromide staining, and flow cytometry. FINDINGS: In this study, CD44 marker was expressed in 6.25% of the cell population in KYSE-30 cell line. The results of flow cytometry revealed that treatment with a combination of retinoic acid and chemotherapeutic drugs could improve cell cycle arrest in CD44+ cells (p<0.05), unlike CD44- cells. Determination of cellular metabolic activity, increased cell apoptosis along with decreased half maximal inhibitory concentration (IC50), and acridine orange/ethidium bromide staining were indicative of the increased percentage of primary and secondary apoptotic CD44+ cells. However, in CD44- cells, these effects were only observed by using a combination of retinoic acid and cisplatin (p<0.05). CONCLUSION: The present results showed that all-trans retinoic acid could increase the toxicity of cisplatin and 5-fluorouracil in CD44+ cells