بررسي اثر عصاره اتيل استاتي قلم دريايي گونه Virgularia gustaviana بر روي زنده ماندن سلول هاي سرطاني

Effect of Ethyl Acetate Extract of Sea Pen Virgularia Gustaviana on Viability of Cancer Cells

سابقه و هدف: با توجه به گسترش سرطان و مقاوم شدن سلول هاي سرطاني به دارو هاي شيميايي و اثرات جانبي آنها، تحقيق جهت يافتن تركيبات جديد طبيعي داراي اهميت است. قلمهاي دريايي با تركيبات شميايي خاص با اثرات ضد سرطاني در سال هاي اخير بسيار مورد توجه قرار گرفته اند. در اين مطالعه استخراج تركيبات شميايي طبيعي قلم هاي دريايي گونه Virgularia gustaviana و تاثير اين تركيبات روي سلول هاي سرطاني بررسي شده است. مواد و روش­ ها: در اين مطالعه تجربي عصاره اتيل استاتي گونه Virgularia gustaviana با استفاده از ستون كروماتوگرافي سيليكاژل جداسازي گرديد و شستشوي ستون با حلال هاي ان هگزان 100 درصد و ان-هگزان:اتيل استات به نسبت هاي 9:1 تا 1:9 انجام گرديد. براي شناسايي كيفي هفت فراكشن جدا شده از ستون (A-G) از روش TLC و كروماتوگرافي مايع با كارايي بالا HPLC استفاده شد. ميزان زنده بودن سلولهاي سرطاني HeLa با استفاده از غلظت هاي 25، 50 و 100 ميكروليتر از فراكشن ها به روش MTT بررسي شد. يافته ­ها: آزمون MTT نشان داد كه فراكشن G به صورت وابسته به دوز باعث كاهش زنده ماندن سلول ها شد و بيشترين پاسخ مربوط به غلظت 100 ميكروليتر است (2/02±6/33 درصد سلول زنده) كه نسبت به گروه كنترل تفاوت معني داري (p>0/05) دارد. فراكشن G بر اساس بررسي HPLC داراي زمان ماندگاري مشابه با سمبران ديترپن جدا شده ازSarcophyton مي­باشد. نتيجه گيري: نتايج مطالعه نشان داد كه تركيبات استخراج شده از Virgularia gustaviana اثر كاهشي بر رشد سلول هاي سرطاني دارند كه براي بررسي مكانيسم اثرگذاري نياز به مطالعه بيشتر مي باشد.

BACKGROUND and OBJECTIVE: Due to high cancer incidence rate and become resistant to chemical drugs and their side effects make it necessary to research on new natural compounds. Sea pen with special chemical compounds with anti-cancer effects have been considered in recent years. In this study, extraction of chemical compounds from marine sea pen Virgularia gustaviana and their effect on cancer cells were investigated. METHODS: In this study the ethyl acetate extract of Virgularia gustaviana was separated by silica gel column chromatography. The column was washed with N-hexane 100% and N-hexane-ethyl acetate solvent at ratio of 9:1 to 1:9. Thin layer chromatography (TLC) and high performance liquid chromatography (HPLC) was used for qualitative identification of seven fractions. Viability of HeLa cancer cells was investigated using MTT assay at the concentration of 25, 50 and a 100 μl/ml compounds. FINDINGS: MTT assay showed that G fraction, dose-dependently decreased cell viability of cells and the most effective concentration was 100 μl (with viability 6.33±2.02% of cancer cells) which was significantly less than control group (p<0.05). Retention time of G fraction in HPLC graph was similar to Cembrane Diterpene isolated from Sarcophyton. CONCLUSION: The results of the studyshowed that compounds extracted from Virgularia gustaviana inhibit the growth of cancer cells and further research will be required to examine the mechanism of effect.