بررسي اثر سميت هيدروليزات پروتئيني جوانه گندم بر سلول‌هاي سرطاني ريه (A549) به روش XTT

Cytotoxic effect proteins hydrolysates from wheat germ on human lung carcinoma A549 cell lines in XTT assay

با توجه به اين­كه درمان سرطان بيشتر از طريق شيمي درماني و داروهاي متعددي صورت مي­پذيرد كه علاوه بر خاصيت درماني با عوارض جانبي شديدي براي بيمار همراه هستند، امروزه دانشمندان در حال بررسي درمان­هاي ضد سرطاني با استفاده از مواد فعال زيستي مي­باشند كه از جمله آنها مي­توان پروتئين­هاي هيدروليز شده و پپتيدهاي زيست فعال با خواص درماني زياد و اثرات جانبي كمتر را بيان كرد. در اين مطالعه براي اولين بار، اثر سيتوتوكسيكي پروتئين­هاي هيدروليز شده جوانه گندم به دست آمده از آنزيم­هاي پپسين، آلكالاز و پروتئيناز K بر روي رده سلولي A549 مورد بررسي قرار گرفت. رده­ي سلولي A549 در محيط كشت RPMI حاوي 10% FBS و 1 % آنتي بيوتيك پني سيلين/ استرپتومايسين (penstrep) كشت داده شد. غلظت­هاي مختلف هيدروليزات در طي زمان­هاي 24، 48 و 72 ساعت بر روي سلول­هاي سرطاني A549 اثر داده شد. در ادامه توانايي حيات سلول­ها با استفاده از روش XTT بررسي شد. نتايج مطالعات حاكي از آن بود كه پروتئين­هاي هيدروليز شده جوانه گندم وابسته به غلظت هيدروليزات و زمان و نوع آنزيم داراي اثر سميت است نتايج IC50 هيدروليزات پپسين، آلكالاز و پروتئيناز K براي سلول­هاي A549 با مدت زمان 72 ساعت به ترتيب برابر با 17/11، 94/12 و 27/11 ميلي­گرم بر ميلي­ليتر به دست آمد. اين نتايج نشان مي­دهد كه هيدروليزات پروتئين جوانه گندم مي­تواند منبع مناسبي از پپتيدهاي ضد سرطان باشد و به عنوان جايگزيني براي درمان­هاي رايج سرطان مورد استفاده قرار بگيرند.

Since cancer treatment has been done through chemotherapy and various drugs that are accompanied with severe side effects in addition to therapeutic properties, nowadays sscientists are investigating anticancer therapies using natural compounds such as hydrolyzed proteins and bioactive peptides with higher treatment properties and fewer side effects. In this study, for the first time, hydrolyzed proteins obtained from pepsin, proteinase k and alcalase enzymes were used to examine its cytotoxic effect on human lung adenocarcinoma cells (A549). Human lung carcinoma A549 cell lines were grown in 90% RPMI medium supplemented with 10% fetal bovine serum and 1% penstrep. Different concentrations of hydrolysates during times of 24, 48 and 72h were affected by A549 cell lines via XTT assay. Then, the cell survival ability was evaluated by XTT method. Results showed that hydrolysates produced from wheat germ protein affected the viability of cells and it depending on the enzyme applied, concentration and time. The results of IC50 were evaluated for A549 cells in the case of pepsin, alcalase and proteinase k hydrolysates at 72 h, 11.17mg/mL, 12.94mg/mL and 11.27mg/mL. These results showed that wheat germ protein hydrolysates would be used as new source of anticancer peptides and could be a replace for common cancer therapy drugs in the near future.