شناسايي و پراكندگي ويروس‌هاي آلوده كننده خيار گلخانه‌اي در منطقه جيرفت و بررسي برخي از خصوصيات فيزيكوشيميايي ويروس موزائيك زرد كدو Zucchini yellow mosaic virus (ZYMV)

Identification and Distribution of Cucumber-Infecting Viruses in the Jiroft Greenhouses and Partial Characterization of Zucchini yellow mosaic virus Collected from This Region

در طي نمونه برداري از گلخانه‌هاي خيار منطقه جيرفت در سال‌هاي1380 تا 1383، 1294 نمونه داراي علائمي از قبيل موزائيك، بدشكلي و تاولي شدن برگ و ميوه جمع آوري گرديد. با استفاده از آزمون‌هاي الايزا و ايمني سنجي نقطه‌اي (Dot immunobinding assay (DIBA ويروس‌هاي موزائيك زرد كدو (Zucchini yellow mosaic virus (ZYMV، موزائيك هندوانه (2 Watermelon mosaic virus-2 (WMV-2، موزائيك خيار (Cucumber mosaic virus (CMV و پژمردگي لكه‌اي گوجه فرنگي (Tomato spotted wilt virus (TSWV شناسايي و تعيين پراكنش شدند. اين بررسي نشان داد كه خيار گلخانه‌اي به ويروس‌‌هاي فوق آلوده است و ZYMV شايع‌ترين ويروس بر روي خيار گلخانه‌اي مي‌باشد. انتقال ويروس‌هاي شته زاد توسط چهار گونه شته شامل Aphis fabae، A. craccivora، A.gossypii و Myzus persicae مورد بررسي گرفت. ويروس موزاييك زرد كدو داراي بالاترين درصد انتقال بين ويروس‌هاي فوق بود و A. craccivora با راندمان بالاي 60 درصد با شته‌هاي فوق منتقل شد. WMV-2 تنها توسط شته A. gossypii منتقل نگرديد. آلودگي نمونه‌هاي آلوده به ZYMV در روش RT-PCR با يك جفت آغازگر كه قطعه‌اي به طول 458 جفت باز از ژن پروتئين پوششي را تكثير مي‌كرد، تأييد شد. آزمون TAS-ELISA با استفاده از آنتي سرم‌هاي مونوكلونال كانادايي نشان داد كه جدايه جيرفت به شاخه يك يا دو از گروه A متعلق مي‌باشد. در آموده نسبتاً خالص ويروس پيكره‌هاي رشته‌اي انعطاف پذير با طول تقريبي 790 نانومتر با ميكروسكپ الكتروني مشاهده شد. وزن مولكولي پروتئين پوششي اين ويروس با روش الكتروفورز در ژل پلي آكريل آميد 36/2 كيلو دالتون تعيين و در آزمون وسترن بلات با استفاده از آنتي سرم تهيه شده بر عليه ويروس به عنوان شناساگر پروتئين پوششي ويروس تأييد گرديد. اين اولين گزارش از حضور ويروس‌هاي فوق روي خيار گلخانه‌اي در منطقه جيرفت مي‌باشد.

Cucumber cultivars, grown in greenhouse in the Jiroft region, were surveyed for the relative incidence of Zucchini yellow mosaic virus (ZYMV), Watermelon mosaic virus-2 (WMV-2), Cucumber mosaic virus (CMV) and Tomato spotted wilt virus (TSWV) from 2001 to 2004. Samples from 1294 plants representing different cultivars were analysed by Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and Dot immunobinding assay (DIBA). The data showed that green-house cucumbers are infected by CMV, ZYMV, TSWV and WMV-2. However, ZYMV was the most prevalent virus. Mixed infection including double and triple infection was identified in some samples. Transmission of aphid-borne viruses (CMV, ZYMV and WMV-2) by Aphis gossypii, A. fabae, A. craccivora and Myzus persicae revealed that ZYMV is most efficiently vectored by these aphids and, A. craccivora transmitted these viruses with more than 60% efficiency. In addition, WMV-2 was not transmitted by A. gossypii. In RT-PCR, ZYMV infection was confirmed by amplifying a PCR product of the predicated size 458 bp, using total RNA extracted from infected plants. All ZYMV infected samples reacted with monoclonal antibodies (705-1, 705-2 and 705-4) in TAS-ELISA test. These results showed that ZYMV isolate collected from Jiroft belongs to group A, cluster 1 or 2. In electron microscopy study, normal length of ZYMV flexuous particles in partial purified preparation was calculated as 790 nm. The molecular weight of coat protein of ZYMV was estimated at 36 KDa., using SDS-PAGE and western blotting. This is the first report of these viruses in greenhouse grown cucumber in the Jiroft region.