توكسين زدايي آفلاتوكسين ‌B1‌ توسط لاكتوباسيلوس رامنوسوس در مدل شبيه‌سازي شده‌ دستگاه گوارش انسان

Detoxification of aflatoxin b1 by Lactobacillus rhamnosus in a simulated model of the human digestive system

سابقه و هدف: بر اساس گزارش سازمان فائو ساليانه 10 درصد از محصولات غذايي توليد شده در دنيا توسط سموم قارچي آلوده مي‌شوند كه در اين آلودگي آفلاتوكسين‌ها سهم بيشتري نسبت به ساير سموم دارند. اين پژوهش با هدف ارزيابي توانايي اتصال آفلاتوكسين به لاكتوباسيلوس رامنوسوس زيرگونه GG در محيط شبيه‌سازي دستگاه گوارش انسان حاوي شيراستريليزه به منظور كاهش سميت آفلاتوكسين B1 انجام شد. مواد و روش‌ها: تعداد باكتري cfu/ml 1010×1 و غلظت آفلاتوكسين 5 ميكروگرم بر ميلي ليتر در نظر گرفته شد كه در محيط شبيه‌ سازي ‌شده ترشحات مصنوعي دستگاه گوارش انسان تلقيح گرديد. در اين مطالعه 6 گروه تيمار در حضور و غياب باكتري‌، شيراستريليزه، سوسپانسيون شيره دستگاه گوارش مورد بررسي قرار گرفت. غلظت آفلاتوكسين باقيمانده توسط كروماتوگرافي مايع با كارايي بالا (HPLC) و تخليص با ستون ايمونوافينيتي تعيين گرديد. يافته ها: كاهش آفلاتوكسين B1 در تمام تيمارها با استفاده از كروماتوگرافي مايع با كارايي بالا با حد تشخيص 0.25 ميكروگرم بر ميلي‌ليتر و حد تعيين كمي 0.75 ميكروگرم بر ميلي‌ليتر اندازه‌گيري شد. مقادير بازيافت مايكوتوكسين AFB1 بين 89 تا 94 درصد بود. منحني درجه‌ بندي آفلاتوكسين B1 با ضريب همبستگي 0.995 در گستره غلظتي 1 تا 10 نانوگرم بر ميلي ليتر خطي بود. بيشترين و كمترين ميانگين درصد حذف آفلاتوكسين B1 به ترتيب مربوط به تيمار5 و 1 ( 0.018 ±58.8 و 0.017± 13.86) بود كه تفاوت معني‌‌داري در بين شش گروه وجود‌ داشت. نتيجه‌ گيري: نتايج نشان داد كه علاوه بر باكتري لاكتوباسيلوس رامنوسوس زير گونه GG، شيره معده و روده كوچك نيز در كاهش يا حذف آفلاتوكسين B1 موثر مي‌‌باشند.

Background & Objectives: According to the FAO annual report, 10 percent of the world's food products are contaminated with fungal toxins, among which aflatoxins have the most contribution as compared to others. This research was aimed to assess the ability of Lactobacillus rhamnosus strain GG in the reduction of aflatoxin B1 (AFB1) in a simulated human gastrointestinal tract containing sterilized milk. Materials & Methods: For this purpose, the bacterial count and aflatoxin concentration were adjusted to 1×1010 cfu/ml and 5 ppm, respectively, where artificial gastrointestinal tract discharges were inoculated in the simulated environment. In this study 6 treatment groups were assessed in the presence and absence of bacteria, sterilized milk, and gastrointestinal juice suspension. The concentration of residual aflatoxin was determined using high-performance liquid chromatography (HPLC) and purification by Immunoaffinity column. Results: The reduction of aflatoxin B1 at all treatments was determined using HPLC with a detection limit of 0.25 mg/ml and a quantification limit of 0.75 mg/ml. The mycotoxin recovery rate was between 89% and 94% for AFB1. The aflatoxin B1 calibration curve with a correlation coefficient of 0.95 was linear in the concentration range of 1 to 10 ng/ml. The highest and lowest average removal percentage of aflatoxin B1 was observed for 5 and 1 treatments (58.8 ± 0.018 and 13.86 ± 0.017) respectively, where a significant difference in removal percentage was observed among six treatment groups. Conclusion: The results indicated that beside L. rhamnosus strain GG, gastric and small intestine juices are suitable to eliminate or reduce aflatoxin B1, as well.