شناسايي مولكولي و ريخت‌شناسي دو گونه از كنه‌هاي خانواده‌Pachylaelapidae Berlese (Acari: Mesostigmata) در استان گيلان

Molecular and morphological identification of two species of mites of the family Pachylaelapidae Berlese (Acari: Mesostigmata) in Guilan province

كنه­ هاي خانواده­Berlese, 1913 Pachylaelapidae كنه ­هايي شكارگر با زندگي آزاد هستند و از بندپايان و نماتودهاي خاك­زي تغذيه مي­كنند. از آن­جا كه تعداد قابل توجهي از كنه­ هاي اين خانواده شباهت ­هاي ريخت­ شناسي به هم داشته و همچنين توصيف ­كنندگان تاكسون­ه اي جديد به برخي از ويژگي­هاي ريخت­ شناسي استناد كرده ­اند كه وجه تمايز كافي براي افتراق آن­ها از تاكسون­ه اي نزديك را ندارند، شناسايي برخي از اين كنه­ها دشوار است. در اين موارد استفاده از روش­هاي نوين شناسايي مي­تواند در اين زمينه راه­گشا باشد. بنابراين، در اين بررسي تلاش شده تا همراه با شناسايي بر مبناي ويژگي­هاي ريخت­ شناسي و اندازه ­اي (شناسايي مورفومتريك)، از روش مولكولي بر پايه ­ي توالي ­يابي ناحيه­ ژني ITS (Internal Transcribed Spacer) براي شناسايي دو گونه­ Olopachys compositus Koroleva, 1976 و Olopachys caucasicus Koroleva, 1976 استفاده شود. به اين منظور پس از استخراج DNA، با استفاده از آغازگر مناسب ناحيه­ ي ITS اين دو گونه تكثير و توالي­ يابي شدند و توالي ­هاي به دست آمده در بانك ژن ثبت شد. پس از هم­رديف­ سازي توالي­ ها، ميزان اختلاف ژنتيكي بين آن­ها 2/3 درصدمحاسبه شد. در نتيجه­ اين بررسي­ها، علاوه بر تفكيك دو گونه­ O. compositus و O. caucasicus بر اساس اختلافات ريختي، روش مولكولي نيز به خوبي اختلاف اين دو گونه را تأييد كرد.

Mites of the family Pachylaelapidae Berlese, 1913 are a group of predatory mites with free-living species, feeding on arthropods and soil-inhabiting nematodes. Identification of these mites is difficult, because of morphological similarities in a significant number of species and also the fact that new taxons descriptors have referred to some morphological features that have not sufficient distinction criteria to differentiate them from close taxons. Therefore, the use of new identification methods can be helpful in this context. In the present study, along with identification, based on morphological characteristics and size (morphometric identification), we used a molecular method, based on the sequencing of the internal transcribed spacer (ITS) gene to identify two species Olopachys compositus Koroleva, 1976 and Olopachys caucasicus Koroleva, 1976. After DNA extraction, ITS region were amplified and sequenced, using the appropriate primers and afterward the sequences were recorded in GeneBank. Alignment of sequences was performed and the genetic differences between species was calculated as 2.3 percent. As a result of these investigations, in addition to the separation of the two species O. compositus and O. caucasicus based on morphological differences, the molecular method also well confirmed the difference between these two species.