بررسي اثر عصاره هيدروالكلي گياه رازيانه (Foeniculum vulgare) بر بيان ژن هاي مرتبط با توليدمثل (گيرنده استروژني و ويتلوژنين) در ماهي ماده گورخري (Danio rerio)

Eeffects of dietary administration of hydroalcoholic extract of fennel (Foeniculum vulgare) on expression of genes related to reproduction (Estrogen receptor and Vitellogenin) in female of zebrafish (Danio rerio)

در اين تحقيق تأثير استفاده از عصاره هيدروالكلي رازيانه در جيره غذايي بر بيان ژن هاي مرتبط با توليد مثل ويتلوژنين (Vtg) و گيرنده استروژن (ERa) در جنس ماده ماهي گورخري (Danio rerio) بررسي شد. تعداد 600 قطعه بچه‌ماهي‌ گورخري با ميانگين وزني 0/01±0/15 ‌گرم در 4 تيمار و 3 تكرار با جيره‌ي غذايي پايه همراه با سه سطح 0، 75، 100 و 150 ميلي­ گرم در كيلوگرم جيره غذايي عصاره به مدت 6 هفته تغذيه شدند. بعد از اين دوره و مشخص شدن جنسيت، جنس نر از آزمايش خارج و جنس ماده به­ مدت 1 ماه به‌وسيله همان جيره­ هاي حاوي عصاره تغذيه ­شدند. در انتهاي دوره جهت مطالعات ژنتيكي از كبد نمونه‌برداري و استخراج RNA انجام شد. براي سنتز cDNA از كيت SuPrimeScript RTase استفاده ‌شد و cDNA حاصله با استفاده از پرايمرهاي ژن‌هاي مذكور و ژن بتا اكتين به‌عنوان ژن رفرنس در Real Time PCR استفاده شد. ارزيابي بيان ژن‌ها افزايش بيان را در تيمارهاي تغذيه شده با عصاره در مقايسه با تيمار كنترل نشان داد. ميزان بيان ژن ويتلوژنين و گيرنده استروژن آلفا در گروه ­هاي تغذيه ‌شده با تيمار حاوي 100 و 75 ميلي گرم بر كيلوگرم عصاره اختلاف معني ­داري را نشان نداد (P>0/05)؛ اما تيمار حاوي 150 ميلي­ گرم در كيلوگرم عصاره افزايش معني­ داري (P>0/05) نسبت به دو تيمار ديگر نشان داد. نتايج نشان مي ­دهد كه استفاده از عصاره هيدرو الكلي رازيانه مي ­تواند به‌عنوان يك راهبرد جديد در بهبود عملكرد توليدمثلي مورد توجه قرار گيرد.

The present study investigates the effect of dietary administration of the hydroalcoholic extract of fennel (Foeniculum vulgare) on expression of genes related to reproduction (ER-a and Vtg) in female zebrafish (Danio rerio). For this purpose, zebrafish with average wight of 0.15±0.01 gr fed on diet supplemented with 0, 75, 100 and 150 mg/kg of diet for 6 weeks. After this period and sex determination, females fed with fennel for 1 month. At the end of feeding trial, RNA extracted from liver, cDNA syntesised with SuPrimeScript RTase kit and PCR were done using primers relate to Vtg, ER-a and Beta-actin as housekeeping genes. Evaluation of reproduction gene expression showed increase in fish fed fennel compare to control. Vtg and ER-a gene expression didn’t show significant differences in fish fed 75and 100 mg/kg (P>0.05). Diet supplemented with 150 mg/kg of fennel showed significant increases compared to two other fennel-fed groups. According to the results it seems that using fennel could considered as a new strategy for improving reproductive performance.