بررسي جراحات هيستوپاتولوژيك ناشي از آلودگي تجربي همزمان ويروس آنفلوانزاي پرندگان تحت تيپ H9N2 و باكتري اورنيتوباكتريوم رينوتراكئال

An Experimental Study of Histopathological Lesions Caused by H9N2 Subtype of Avian Influenza Virus and Ornithobacterium Rhinotracheale Co-Infection

زمينه مطالعه: علي‌رغم اينكه ويروس آنفلوانزاي تحت تيپ H9N2 و باكتري اورنيتوباكتريوم رينوتراكئال (ORT) به تنهايي قادر به ايجاد جراحات هيستوپاتولوژيك در پرندگان عفوني هستند. اما تا به حال، مطالعه‌اي در خصوص جراحات بافتي ناشي از اين عوامل بيماريزا به صورت همزمان در جوجه‌هاي عاري از عوامل بيماريزاي خاص (SPF) انجام نشده است. هدف: هدف از اين مطالعه بررسي نوع، شدت و ميزان جراحات بافتي عفونت همزمان ويروس آنفلوانزاي پرندگان تحت تيپH9N2 و باكتري اورنيتوباكتريوم رينوتراكئال در جوجه‌هاي SPF مي‌باشد. روش‌كار: تعداد 60 قطعه جوجه SPF نژاد لگهورن يك روزه به صورت تصادفي در سه گروه بيست تايي تقسيم شدند. سپس در سن 21 روزگي، جوجه‌هاي گروه اول فقط با ويروس آنفلوانزا و جوجه‌هاي گروه دوم با ويروس آنفلوانزا و باكتري ORT به طور همزمان تلقيح شدند و گروه سوم بعنوان كنترل PBS دريافت كردند. در روزهاي 2 تا 16 پس از تلقيح، سه پرنده از هر گروه به صورت تصادفي انتخاب و مورد كالبدگشايي قرار گرفتند. نمونه‌هاي بافتي از ناي، ريه‌، كبد، كليه، بورس فابريسيوس، تيموس، طحال و لوزه‌هاي سكومي جهت مطالعه هيستوپاتولوژي اخذ گرديد و پس از آماده سازي و تهيه مقاطع بافتي به ضخامت‌هاي 6-5 ميكروني با روش هماتوكسيلين و ائوزين رنگ آميزي شدند. نتايج: شدت جراحات هيستوپاتولوژي در جوجه‌هاي گروه دوم نسبت به گروه اول بيشتر بود. هيچ گونه تغييرات بافتي در گروه كنترل مشاهده نشد. نتيجـه‌گيـري‌نهايي: نتايج اين مطالعه نشان داد در جوجه‌هاي عفوني شده به طور همزمان با تحت تيپ H9N2 ويروس آنفلوانزا و باكتري ORT، جراحات هيستوپاتولوژي ناشي از ويروس آنفلوانزا تشديد مي‌يابد.

BACKGROUND: Avian influenza virus H9N2 subtype and Ornithobacterium rhinotracheale (ORT) causes histopathological lesions in birds. Yet, there is not any study on tissue lesions caused by these pathogens co-infection in specific pathogen free (SPF) chicks. OBJECTIVES: The aim of this study was to evaluate the type, severity and extent of histopathological lesions induced by co-infection of H9N2 subtype avian influenza virus and Ornithobacterium rhinotracheale in SPF chickens. METHODS: Sixty, one-day-old SPF chicks were divided randomly into three groups of twenty. At 21 days, the chicks in the first group were infected with H9N2 subtype AI virus and the second group was inoculated with H9N2 subtype AI virus and ORT simultaneously. The third group was inoculated with PBS as control. Then, three birds from each group were randomly selected and euthanized and autopsied at 2 till 16 days post-inoculation (DPI). The tissue samples were collected from trachea, lungs, liver, spleen, thymus, kidneys, cecal tonsil and bursa of fabricius. They were cut into 5 to 6 μm thickness sections using paraffin embedding method and were stained by Hematoxylin and Eosin (H&E). RESULTS: The severity of histopathological lesions in the second group was higher than first group. Tissue changes were not observed in control group. CONCLUSIONS: The results of this study showed that infected chickens with H9N2 subtype AI virus and ORT simultaneously cause exacerbated histopathological lesions compared to H9N2 subtype of AI virus