عنوان مقاله :
مقايسه روش‌هاي متفاوت استخراج DNA و ايجاد روش Simplex PCR به‌منظور شناسايي باقي‌مانده DNA ژنومي در فرآورده‌هاي رب گوجه‌فرنگي
پديد آورندگان :
مرمر ، يزداني دانشگاه آزاد اسلامي واحد تهران مركزي - گروه زيست شناسي , اردشير ، حسام پور دانشگاه آزاد اسلامي واحد تهران مركزي - گروه زيست شناسي
كليدواژه :
استخراج DNA ژنومي , فرآورده‌هاي گوجه‌فرنگيDNA ماركر , D , Loop ميتوكندريايي
چكيده فارسي :
امروزه با پيشرفت علم بيوتكنولوژي و روش‌هاي مولكولي به‌منظور بررسي ارگانيسم‌هاي موجود در فرآورده‌هاي غذايي از DNA ماركرها و واكنش زنجيره‌اي پليمراز (PCR) استفاده مي‌شود. ازآنجايي‌كه كيفيت DNA براي تمامي آناليزهاي ژنتيكي كه بر روي ماركرهاي مولكولي پايه‌ريزي شده باشد اهميت زيادي دارد، روش استخراج DNA ژنومي باكيفيت بالا حائز اهميت است. در بيشتر روش‌هاي استخراجDNA ژنومي سه نكته اساسي مدنظر است كه شامل كيفيت DNA استخراج‌شده، سرعت روش و ميزان محصول آن مي‌باشد. در اين مطالعه 6 روش براي استخراج DNA از فرآورده‌هاي گوجه‌فرنگي به‌منظور مطالعه تقلبات غذايي و بررسي حضور گوجه‌فرنگي دست ورزي ژنتيكي شده (GMO)، استفاده شد و درنهايت پس از انتخاب مناسبترين روش، نمونه DNA ژنومي جهت بررسي توسط پرايمرهاي اختصاصي ناحيه D-loop ميتوكندريايي مورد‌استفاده قرار گرفت. نتـايـج : در اين مطالعه پس از بررسي‌هاي كمي و كيفي از طريق الكتروفورز و استفاده از دستگاه نانودراپ مشخص شد كه از بين روش‌هاي استخراج DNA ژنومي بررسي‌شده، روش Wizard بر پايه اتصال اختصاصي DNA به غشاهاي سيليكايي (ستون) براي استخراج DNA رب‌گوجه‌فرنگي مناسبترين است. پس از استخراج DNA از رب‌گوجه‌فرنگي، قطعه ماركر 280 جفت بازي از ناحيهD-Loop ميتوكندريايي‌گوجه‌فرنگي با استفاده از جفت آغازگرهاي اختصاصي گوجه‌فرنگي طي واكنش زنجيره‌اي پليمراز به طور اختصاصي تكثير شد و نتايج نشان داد كهDNA رب‌گوجه‌فرنگي قابل تكثير با آغازگرهاي اختصاصي گوجه‌فرنگي مي‌باشد. نتايج مطالعه انجام‌شده نشان داد مي‌توان انواع نمونه‌هاي گوجه‌فرنگي را قبل و بعد از فرآوري از جهت بررسي تقلبات غذايي در رب‌گوجه‌فرنگي و حضور گوجه ترانس ژنتيك در مواد غذايي تركيبي و فراوري‌شده موردبررسي قرارداد.
عنوان نشريه :
ميكروبيولوژي كاربردي در صنايع غذايي
عنوان نشريه :
ميكروبيولوژي كاربردي در صنايع غذايي
