جهش در ناحيه داغ جهش پذيري ژن ERG11 و مقاومت به فلوكونازول در جدايه هاي كلينيكي كانديدا آلبيكنس در شهر

MUTATION IN HOTSPOT REGIONS OF THE ERG11 GENE and FLUCONAZOLE RESISTANCE IN CLINICAL ISOLATES OF CANDIDA ALBICANS IN RASHT CITY

پيش زمينه و هدف امروزه مصرف متداول آزول ها منجر به افزايش مقاومت به آزول ها در ميان سويه هاي كانديدا آلبيكنس شده است. جابجايي هاي آمينواسيدي در آنزيم هدف آزول، ERG11p، به مقاومت آزولي در بعضي از سويه هاي كلينيكي كانديدا آلبيكنس نسبت داده مي شود. هدف از اين مطالعه، ارزيابي جهش هاي ژن ERG11 در جدايه هاي مقاوم به فلوكونازول كانديدا آلبيكنس در رشت بود. مواد و روش كار در اين مطالعه، نمونه هاي كلينيكي از مخاط واژينال 50 زن جداسازي شد. جدايه هاي كانديدا آلبيكنس با استفاده از روش هاي استاندارد تعيين هويت چون توليد لوله زايا و كشت در محيط كروم آگار شناسايي شدند. مقاومت و حساسيت جدايه ها به فلوكونازول به كمك روش هاي ديسك ديفيوژن و براث ميكرودايلوشن بررسي شد. جهش ها در ژن ERG11 در جدايه هاي كلينيكي به روش PCR- سكوئنسينگ تعيين شد. يافته ها در اين مطالعه، 20 جدايه كلينيكي كانديدا آلبيكنس مقاوم به فلوكونازول بودند. بالاترين MIC ي فلوكونازول µg/ml 2048 تعيين گرديد. همچنين در هشت جدايه مقاوم به فلوكونازول به روش PCR-توالي يابي، دو جهش بدمعني (V437I و V488I) در ژن ERG11 يافت شد. نتيجه گيري به نظر مي رسد كه داشتن هم زمان چند جهش در ژن ERG11، يك علت MIC ي بالا در جدايه هاي مقاوم كانديدا آلبيكنس در اين مطالعه باشد. بااين حال، بررسي ديگر مكانيسم هاي مقاومت به آزول در جدايه هاي كانديدا آلبيكنس پيشنهاد مي شود.

Background & Aims: Nowadays, the common use of azoles has led to increased resistance to azole among Candida albicans strains. Amino acid substitutions in azole target enzyme, ERG11p, is attributed to azole resistance in some clinical strains of Candida albicans. The aim of this study was to evaluate ERG11 gene mutations in fluconazole-resistant isolates of Candida albicans in Rasht. Materials & Methods: In this study, the clinical specimens were isolated from the vaginal mucosa of 50 women. Candida albicans isolates were identified using standard identification methods such as germ tubes production and culture in CHROMagar media. Resistance and susceptibility of isolates to fluconazole were investigated through disc diffusion and broth micro-dilution methods. The mutations in the ERG11 gene were determined in clinical isolates using PCR-sequencing method. Results: In this study, 20 clinical isolates of Candida albicans were resistant to fluconazole. The highest MIC of fluconazole was determined at 2048 μg/ml. Also, in eight fluconazole-resistant isolates by PCRsequencing, two missense mutations (V437I and V488I) were found in the ERG11 gene. Conclusion: It seems that having several mutations in the ERG11 gene is a reason for high MIC in resistant isolates of Candida albicans in this study. However, investigating other mechanisms of azole resistance is recommended in Candida albicans isolates.