بررسي اثرات الايژيك اسيد بر جمعيت و فعاليت سلول‫هاي نوروگليال سيستم عصبي مركزي در مالتيپل اسكلروزيس القا شده توسط كوپريزون‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬

Study of the Effects of Ellagic Acid on Population and Activity of Central Nervous System Neuroglia Cells in the Cuprizone-induced Multiple Sclerosis

الايژيك اسيد (ea) يك تركيب آنتي اكسيدان طبيعي با ساختار فنلي است. در اين مطالعه تاثيرات حفاظتي آن بر جمعيت و فعاليت سلول‫هاي گليال در مدل حيواني ام اس در شرايط استرس اكسيداتيو مورد بررسي قرار گرفت.مواد و روش‫ها: موش‫هاي c57bl/6 بالغ نر 8 تا 9 هفته اي تهيه و در شرايط استاندارد نگهداري شدند. جهت ايجاد مدل، حيوانات به مدت شش هفته غذاي حاوي 0.2 درصد كوپريزون (cup) را مصرف نمودند. حيوانات به هشت گروه شامل كنترل، كنترل دريافت كننده سه دوز ea (20، 40 و 80 ميلي گرم بركيلوگرم)، cup و cup دريافت كننده سه دوز ea تقسيم شدند. در انتها بافت مغز حيوانات توسط روش هاي مولكولي شامل ايمونوهيستوشيمي (ihc)، وسترن بلات (wb) و ريل تايم پي سي ار (qpcr) جهت تجزيه و تحليل ماركرهاي اختصاصي سلول هاي گليال مورد استفاده قرار گرفت.يافته ها: آناليز ihc و wb نشان داد كه تنها غلظت بالاي ea قادر به كاهش بيان پروتئين هاي gfap (شاخص آستروسيت‫هاي فعال)، mac3 (شاخص ميكروگليال هاي فعال)، افزايش بيان پروتئين‫ olig2 (شاخص اليگودندروسيت هاي پيش ساز) و در نهايت كاهش معنادار نسبت پروتئين apc (شاخص اليگودندروسيت هاي بالغ) به olig2 نسبت به گروه cup مي باشد. تجريه و تحليل qpcr نيز نشان داد تغييرات بيان mrna اين شاخص ها نيز با تغييرات پروتئين هاي آن ها همسان بوده و از اين رو نتايج قبلي تاييد گرديد.نتيجه گيري: مصرف (80 ميلي گرم بر كيلوگرم) ea به طور موثر فعاليت آستروسيت ها و ميكروگليال ها را كاهش داده و محيط را جهت مهاجرت سلول هاي پيش ساز اليگودندروسيتي به ناحيه عارضه و تبديل فرآيندهاي تخريبي به مكانيسم هاي ترميمي مساعد مي نمايد.

Ellagic acid (EA) is a natural antioxidant with phenolic structure. In this study, we evaluate the effects of EA consumption on population and activation of neuroglia cells in the animal model of MS under oxidative stress. Materials and Methods: Mature male mice with age of between 8 to 9 weeks were kept in the standard conditions. For model induction, animals received powder normal diet containing 0.2% Cuprizone (Cup) for six weeks. Mice were divided into eight groups containing control, control receiving three doses of EA (20, 40 and 80 mg/kg), Cup and Cup receiving three doses of EA. Finally, specific glial cell markers in the animal brain tissues were analyzed by molecular methods such as immunohistochemistry (IHC), western blotting (WB) and Real Time- PCR (RT-PCR). Findings: IHC and WB analysis have shown that only high concentration of EA is able to reduce protein expression of GFAP (activated astrocytes marker), Mac-3 (activated microglial marker), increase protein expression of Olig-2 (oligodendrocytes precursor marker) and ultimately significant reduction on APC (mature oligodendrocytes marker)/Olig-2 ratio in comparison with Cup group. In addition, RT-PCR evaluation indicated that changes in the mRNA expression of target markers were consistent with observed changes in their protein expression and therefore, IHC and WB results were confirmed. Conclusion: Consumption of 80 mg/kg of EA effectively decreased activation of astrocytes and microglial and so appropriates environment for migration of oligodendrocyte precursor cells to the lesion area and shifting from damage course into the repair progressions.