مطالعه فعاليت آنتي اكسيداني عصاره گياه شيرين بيان(Glycyrrhiza glabra L) و اثر حفاظتي عصاره برگ بر مسموميت كليوي القاء شده با اتانول در موش هاي صحرايي نر

Antioxidant Activity of Glycyrrhiza glabra L. Extract and Protective Effect of its Leaf Extract on Ethanol-Induced Nephrotoxicity in Male Rats

مصرف حاد الكل باعث القاء پراكسيداسيون ليپيد در بافت كليه مي شود، اما مصرف مزمن آن اثرات خفيفي بر ويژگي هاي بيوشيميايي و بافت شناختي كليه دارد. تركيبات آنتي اكسيداني بافت ها را در برابر تنش اكسيداتيو و آسيب القاء شده با اتانول محافظت مي كنند. هدف از اين مطالعه، ارزيابي محتواي تركيبات فنلي و فعاليت آنتي اكسيداني عصاره برگ و ساقه گياه شيرين بيان و نيز نقش حفاظتي عصاره برگ اين گياه در مسموميت كليوي القاء شده با اتانول بود. مواد و روش ها ارزيابي محتواي فنل و فلاونوئيد تام عصاره برگ و ساقه شيرين بيان به ترتيب به روش هاي فولين-سيوكالتو و كلريد آلومينيوم انجام شد. سنجش فعاليت آنتي اكسيداني اين عصاره ها به روش مهار رايكال آزاد 2, 2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) انجام شد. به علاوه اثر حفاظتي عصاره برگ اين گياه، پس از تيمار دهاني چهار گروه موش صحرايي نر نژاد ويستار شامل گروه 1 يا كنترل (روزانه 1 ميلي ليتر آب) ، گروه 2 (روزانه 1 ميلي ليتر اتانول 50 درصد) ، گروه 3 (روزانه 500 ميلي گرم/كيلوگرم عصاره برگ و 1 ميلي ليتر اتانول 50 درصد) و گروه 4 (روزانه 500 ميلي گرم/كيلوگرم عصاره برگ) توسط ارزيابي شاخص هاي بيوشيميايي و بافت شناختي بافت كليه انجام شد. مطالعه بافت شناختي با استفاده از رنگ آميزي هماتوكسيلين-ائوزين رنگ آميزي و توسط ميكروسكوپ نوري انجام شد. در نهايت داده هاي حاصل با استفاده از نرم افزارSPSS vol. 20 آناليز و با آزمون دانكن در سطح P<0. 05 گروه بندي شدند. يافته هاي پژوهش: عصاره ساقه شيرين بيان محتواي فلاونوئيدي بالاتري از عصاره برگ داشت. عصاره هاي ساقه و برگ فعاليت آنتي اكسيداني (93-86 درصد) خوبي نسبت به اسيد آسكوربيك (71 درصد) نشان دادند. نتايج آناليز بيوشيميايي بر روي بافت كليه موش هاي صحرايي نر نشان داد كه فعاليت آنزيم سوپر اكسيد ديسموتاز (SOD) و محتواي پراكسيد هيدروژن در گروه تيمار شده با اتانول افزايش يافت، اما تغيير معني داري در محتواي پروتئين كل و مالون دي آلدئيد (MDA) آن گروه مشاهده نشد. هم چنين نتايج حاصل از مطالعات بافت شناسي نشان داد كه بافت كليوي موش هاي صحرايي نر تيمار شده با اتانول در مقايسه با گروه كنترل، دچار آسيب شده و عصاره گونه مورد مطالعه اين آسيب را تعديل نمود. بحث و نتيجه گيري: به نظر مي رسد عصاره گياه شيرين بيان واجد فعاليت زيستي است و در آينده مي تواند به عنوان يك آنتي اكسيدان طبيعي جديد در صنايع غذايي و دارويي به كار رود.

Acute alcohol consumption leads to induction of lipid peroxidation in renal tissues, but its chronic consumption has moderate effects on biochemical and histological characteristics of this organ. Antioxidants have protective effects against ethanol-induced oxidative stress and tissue injury. The aim of this study was to assess antioxidant activity of Glycyrrhiza glabra leaf and stem extracts and the protective effect of its leaf extract on ethanol-induced nephrotoxicity. Materials & methods Total phenol and flavonoid contents of leaf and stem extracts of G. glabra were measured by Folin Ciocalteu and AlCl3 assays, respectively. Antioxidant activity of both extracts was assessed using 2, 2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) free radical scavenging. In addition, protective effect of the leaf extract was assessed using biochemical and histological analyses of renal tissues of male Wistar rats, which were divided into four groups including group 1 or control (received 1 ml distilled water daily), group 2 or ethanol group (received 1 ml of 50% ethanol daily), group 3 or ethanol + leaf extract group (received 1 ml of 50% ethanol + 500 mg/kg leaf extract daily), and group 4 (received 500 mg/kg of leaf extract daily). All treatments are performed through intragastric administration. Biochemical and histological analyses were used for the evaluation of nephrotoxicity. For histological study, the samples were stained with Hematoxylin-Eosin and examined by light microscopy. Finally, all the data were analyzed by SPSS (Ver. 20) and grouped by Duncan's Multiple Range Test at P <0.05 level. Findings: There was no significant difference between total phenol contents of the stem and leaf extracts. However, the stem extract showed a higher total flavonoid content than the leaf extract. Also, both the extracts showed higher antioxidant activities (86-93%) than that of ascorbic acid (71%). Results from biochemical analysis indicated a significant increase in superoxide dismutase (SOD) activity and H2O2 content in the renal tissues of ethanol-treated rats in comparison with other groups; however, there were no significant changes in total protein and malondialdehyde (MDA) contents. Results from histological examination showed that alcohol consumption intensity injured kidney tissues, which was effectively moderated by the studied extract. Discussion & Conclusions: Results from the present study showed that G. glabra extract has biological activity and can be used in future as a new natural antioxidant in food and drug industries.