تغيير الگوي بيان mir-1246 و mir-224 در رده‫هاي سلولي سرطان سينه پس از تيمار با داروي ضد سرطاني تاكسول

Alterations in the Expression Level of mir-1246 and mir-224 in Breast Cancer Cell Lines After Treatment with Taxol Chemotherapeutic Agent

زمينه و هدف: سرطان سينه يكي از شايع‫ترين سرطان ها در ميان زنان در سراسر دنيا است، كه يكي از داروهاي مورد استفاده براي درمان آن، تاكسول مي‫باشد. هدف از اين مطالعه، بررسي تغييرات بيان mir-1246 و mir-224 در چهار رده سلولي سرطان سينه پس از تيمار با تاكسول با هدف معرفي آنها به عنوان ماركر زيستي جهت پاسخ‫دهي يا مقاومت به درمان بود. روش كار: در اين مطالعه آزمايشگاهي، چهار رده سلولي MCF-7، MDA-MB-231، SKBR-3 و BT-474 در محيط كشت RPMI1640 داراي FBS 10% و آنتي بيوتيك كشت داده شده و سپس براي تعيين IC50 تاكسول، آزمون MTT انجام گرفت. سپس، سلول‫ها به مدت 24 ساعت در معرض غلظت IC50 تاكسول قرار گرفته و پس از اين مدت، RNA استخراج و cDNA سنتز گرديد. تغيير در الگوي بيان mir-1246 و mir-224 با استفاده از qRT- PCR بصورت كمي بررسي شد. يافته ها: پس از تيمار با تاكسول، mir-1246 در دو سلول داراي بيان بالاي HER-2 يعني BT-474 و SKBR-3 بطور معني‫دار افزايش (به ترتيب 113 و 1/4 برابر) و در دو سلول ديگر فاقد بيان HER-2 يعني MCF-7 و MDA-MB-231 بطور معني‫داري كاهش نشان داد (به ترتيب 45/5 و 7/7 برابر). mir-224 تنها در دو سلول SKBR-3 و MDA-MB-231 بيان داشت، كه آن هم پس از تيمار با تاكسول بطور معني‫داري كاهش نشان داد (به ترتيب 2/1 و 17/2 برابر). نتيجه گيري: بدليل تفاوت در الگوي تغيير بيان mir-1246 در انواع سرطان سينه داراي بيان بالاي HER-2 و انواع داراي فاقد بيان آن به تيمار با تاكسول، اين miRNA مي‫تواند به عنوان يك ماركر زيستي براي پاسخدهي انواع سرطان سينه متفاوت از نظر بيان HER-2 به شيمي درماني با تاكسول مورد استفاده قرار گيرد.

Background & objectives: Breast cancer is one of the most important cancers in women worldwide. Taxol as a chemotherapeutic agent, is used for treatment of breast cancer.The aim of this study was to investigate alterations in the expression of mir-1246 and mir-224 in four breast cancer cell lines after Taxol treatment with the goal of introducing them as a biochemical marker for determining response or resistance of breast cancer to the Taxol therapy. Methods: In this in vitro study, four breast cancer cell lines including MCF-7, MDA-MB-231, SKBR-3 and BT-474 were cultured in RPMI1640 medium supplemented with 10% FBS and antibiotics. Then, MTT assay was performed to determine IC50 concentration of Taxol. Cells were treated for 24 hours and then RNA extraction and cDNA synthesis were performed. Alterations in the expression level of mir-1246 and mir-224 were quantitated using qRT- PCR. Results: After treatment with Taxol, the expression level of mir-1246 was significantly up-regulated in two HER2-overexpressing cell lines, BT-474 (113 fold) and SKBR-3 (1.4 fold), and down-regulated in two HER2-negative cell lines, MCF-7 (45.5 fold) and MDA-MB-231 (7.7 fold). Expression of mir-224 was detected only in two cell lines including SKBR-3 and MDA-MB-231, and was down-regulated after treatment with Taxol (2.1 and 17.2 fold, respectively). Conclusions: According to the different pattern of alteration in the expression level of mir-1246 in HER2-overexpressing breast cancer cell lines compared to HER2-negative cell lines after treatment with Taxol, this miRNA could be a useful biomarker for responsiveness to Taxol in different types of HER2-positive and -negative breast cancers.